Интер тиг 200 аврора: Доступ ограничен: проблема с IP

Содержание

Аппарат аргонодуговой сварки AURORA INTER TIG 200 AC/DC PULSE Mosfet

Подробное описание товара:


INTER TIG 200 AC/DC PULSE — самый популярный аппарат для аргоно-дуговой сварки от сети 220В. Предназначен для профессиональной импульсной сварки постоянным и переменным током TIG AC/DC и для полноценной сварки штучным плавящимся электродом MMA, также на постоянном и переменном токе. Имеются все необходимые настройки, с помощью которых можно добиваться самого высокого качества сварки алюминия, стали, нержавейки и любых цветных металлов. На удобной, понятной любому сварщику циклограмме отдельно настраивается режим ПУЛЬС и регулируется каждая стадия сварочного процесса для выполнения максимально широкого круга сварочных задач. Применение: декоративные работы, монтажные работы, промышленность, строительство трубопроводов высокого давления, алюминиевые конструкции.

Особенности и Преимущества:


  • Универсальный источник для аргонодуговой сварки на постоянном токе TIG DC (5-200А) и для сварки алюминия переменным током TIG AС (20-200А).
  • Режим сварки плавящимся электродом MMA на постоянном токе и на переменном токе позволяет работать с любыми типами электродов.
  • Режим PULSE для работы с материалами разных толщин, для ответственных и декоративных работ.
  • Интуитивно понятная панель управления для идеальной настройки параметров сварки.
  • Подключение пульта дистанционного управления ДУ для проведения удаленных работ (опция).
  • Высокочастотный бесконтактный поджиг дуги HF.
  • Работа при пониженном напряжении питающей сети.
  • Комплект сварочных акссессуаров в стандартной поставке.

Комплектация:

  1. Горелка TIG 26, 4 метра — 1 шт.
  2. Кабель 16mm2, 3 метра — 2 шт.
  3. Держатель электрода 200A — 1шт.
  4. Зажим на массу 300А — 1 шт.

Сварочный аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO Inter TIG 200 Mosfet

Сварочный аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO Inter TIG 200 Mosfet предназначен для аргонно-дуговой сварки на постоянном токе TIG DC и для сварки штучным электродом MMA. Данная модель отличается стабильной и безотказной работой от обычной питающей сети 220В. Аппарат может широко применяться для сварки углеродистой стали, нержавеющей стали, различных сплавов стали, меди, и других цветных металлов. Оснащен системой высокочастотного бесконтактного поджига сварочной дуги. В режиме работы с обычным электродом MMA аппарат также демонстрирует хорошие сварочные свойства, легкий поджиг и мягкое горение дуги.

Особенности: универсальный источник для аргонодуговой сварки TIG DC и для обычной ручной дуговой сварки MMA; легкий высокочастотный бесконтактный поджиг дуги HF; классический инвертор на базе технологии MOSFET; комплект аксессуаров в стандартной поставке; портативный и компактный.

Комплектация:

  • горелка TIG 4 метра — 1 шт.
  • кабель 16mm2, 3 метра — 2 шт.
  • держатель электрода 200A — 1шт.
  • зажим на массу 300А — 1 шт.

Таблица сравнения характеристик:

Наименование

Потребляемая мощность (кВт)

Рекомендуемая мощность генератора (кВа)

Сварочное напряжение max. (В)

Сварочный ток max. (А)

Диаметр электродов max. (мм)

Цена, руб
Сварочный аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO Inter TIG 300 (TIG+MMA) 380В 7,8 8,4 22 300 5
Сварочный аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO Inter TIG 200 Mosfet 4,5 6,2 28 200 5
Сварочный аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO Inter TIG 202 (TIG+MMA) 4,5 6,2 28 200 4
Сварочный аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO Inter TIG 250 (TIG+MMA) 6
6,5
20 250 5
Сварочный аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO Inter TIG 200 PULSE (TIG+MMA) 4,5 6,2
28
200 3,2
Сварочный аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO Inter TIG 300 (TIG+MMA) 220В 7,8 8,4 22 300 5
Сварочный аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO Inter TIG 200 AC/DC PULSE Mosfet 4,5 6,2 28 200 5
Сварочный аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO Inter TIG 200 AC/DC PULSE Mosfet + аттестат НАКС 4,5 6,2 28 200 5

Аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE (НАКС)

Характеристики Преимущества Комплектация Документация
Технические характеристики: Аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE (НАКС)
Максимальный ток, А 200 Напряжение сети, В 220
Частота сети, Гц 50/60 Диаметр электрода, мм 1.0-3.2
ПВ на max токе, % 60 Диапазон регулирования сварочного тока, А 10-200
Max потребляемый ток, А 28.2 Напряжение холостого хода, В 44
Потребляемая мощность, кВА 5.6 Степень защиты IP21
Импульсный режим есть Класс изоляции F
Габариты, мм 498x328x302 Вес, кг 20

Описание: Аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE (НАКС)

Аппарат Aurora PRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE (НАКС) предназначен для аргонодуговой сварки на постоянном и переменном токе TIG и для сварки штучным электродом MMA. Данная модель отличается стабильной и безотказной работой от обычной питающей сети 220В. Аппарат может широко применяться для сварки углеродистой стали, нержавеющей стали, различных сплавов стали, меди, и других цветных металлов. Оснащен системой высокочастотного бесконтактного поджига сварочной дуги. В режиме работы с обычным электродом MMA аппарат также демонстрирует хорошие сварочные свойства, легкий поджиг и мягкое горение дуги.

Обзор универсального сварочного аппарата AuroraPRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE

Удобная переноска
Рукоятка специальной формы позволяет с легкостью переносить аппарат с одного места на другое.
Простое управление
Все элементы управления аппарата расположены в одном месте, что удобно для пользователя. Панель управления содержит регулятор сварочного тока, напряжения, выключатель, а также светодиодные индикаторы.
Быстрое подключение
Специальные разъемы дают возможность быстро подключить сварочные кабели и приступить к работе. Надежное соединение исключает потери тока и нагрев в местах контакта.

Комплектация:

  • горелка TIG 26;
  • клемма заземления 300 А с кабелем;
  • электрододержатель 200 А с кабелем.

16090

Аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE (НАКС)

Компания-производитель оставляет за собой право на изменение комплектации и места производства товара без уведомления дилеров!

Аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE с доставкой в Минск и по всей Беларуси

INTER TIG 200 AC/DC PULSE — самый популярный аппарат для аргоно-дуговой сварки от сети 220В. Предназначен для профессиональной импульсной сварки постоянным и переменны током TIG AC/DC и для полноценной сварки штучным плавящимся электродом MMA, также на постоянном и переменном токе. Имеются все необходимые настройки, с помощью которых можно добиваться самого высокого качества сварки алюминия, стали, нержавейки и любых цветных металлов. На удобной, понятной любому сварщику циклограмме отдельно настраивается режим ПУЛЬС и регулируется каждая стадия сварочного процесса для выполнения максимально широкого круга сварочных задач.

Панель управления:

  1. стартовый сварочный ток в режиме TIG (Start A), (отображается на дисплее)
  2. рабочий сварочный ток в режиме TIG и MMA (Welding A), (не отображается на дисплее)
  3. регулировка нижнего уровня сварочного тока для пульса  (Back ground A)
  4. регулировка заварки кратера (Down Slope), (работает только в 4Т режиме)
  5. регулировка частоты пульса (Pulse Frequency)
  6. регулировка баланса пульса (Pulse Width)
  7. регулировка продувки металла газом после сварки Post Flow (Post Time)
  8. регулировка баланса переменного тока (AC Balance)
  9. включение/выключение дистанционного управления (при работе без д/у переключатель должен быть в положении «OFF»)
  10. включение/выключение режима пульс
  11. переключение между режимами TIG и MMA
  12. переключение между 2-х и 4-х тактными режимами работы
  13. переключение между постоянным и переменным током (AC/DC)

Особенности:

  • универсальный источник для аргонодуговой сварки на постоянном токе TIG DC (5-200А) и для сварки алюминия переменным током TIG AС (20-200А)
  • режим сварки плавящимся электродом MMA на постоянном токе и на переменном токе позволяет работать с любыми типами электродов
  • режим PULSE для работы с материалами разных толщин, для ответственных и декоративных работ
  • интуитивно понятная панель управления для идеальной настройки параметров сварки
  • подключение пульта дистанционного управления ДУ для проведения удаленных работ (опция)
  • высокочастотный бесконтактный поджиг дуги HF
  • работа при пониженном напряжении питающей сети
  • комплект сварочных акссессуаров в стандартной поставке

Применение: 

  • декоративные работы
  • монтажные работы
  • промышленность
  • строительство трубопроводов высокого давления
  • алюминиевые конструкции

Комплектация:

  • горелка TIG 26, 4 метра — 1 шт.
  • кабель 16mm2, 3 метра — 2 шт.
  • держатель электрода 200A — 1шт.
  • зажим на массу 300А — 1 шт.
  • Вольфрамовый электрод — 1 шт
  • Длинный колпачок
  • Короткий колпачок
  • Цанга — 4 шт
  • Сопло — 4 шт

Cварочный аппарат TIG 200 AURORA PRO INTER TIG 200 AC DC PULSE

Код товара: 3531

Производитель: Aurora

В магазине: 2 шт.

Есть на складе

Бесплатная доставка по СПб

Уточняйте цену

Оставить заявку

Cварочный аппарат AURORA PRO TIG 200 AC DC в СПб

  Аппарат AuroraPRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE является уже аппаратом профессионального уровня и предназначен для аргонодуговой сварки постоянным током DC и переменным током AC, что является особенно важным при работе с капризным алюминием.
  Данная модель является настолько удачной, что практически не подвергалась доработке, а отработанная годами схема на транзисторах MOSFET сделала AuroraPRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE лучшим в линейке аппаратов AuroraPRO для аргонодуговой сварки .
  В своем арсенале имеет ряд функциональных особенностей, которые делают данный аппарат уникальным в своем классе:

  • регулировка баланса AC позволяет получить нужную степень катодной очистки алюминия и, как следствие, отличный шов.
  • регулировка нижнего уровня сварочного тока (Back ground A) дает возможность сварщику максимально уменьшить «текучесть» сварочной ванны, что особенно актуально при работе с алюминием.
  • регулировка  заварки кратера (Down Slope) помогает получить качественный шов и контролировать процесс продувки металла газом после сварки.
  •  На постоянном токе DC сварочный ток можно снизить до 5 Ампер, что делает возможным сварку металла толщиной менее миллиметра!

 

Регулировки AURORA PRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE:

 

 

 

  1. Заданный стартовый сварочный ток в режиме TIG (отображается на дисплее)
  2. Рабочий сварочный ток в режиме TIG и MMA (не отображается на дисплее)
  3. Регулировка нижнего уровня сварочного тока для пульса (Back ground A)
  4. Регулировка заварки кратера (работает только в 4T режиме)
  5. Регулировка частоты пульса (Pulse Frequency)
  6. Регулировка длительности пульса (Pulse Width)
  7. Регулировка продувки металла газом после сварки (Post Flow)
  8. Регулировка баланса переменного тока (AC Balance)
  9. Включение/выключение дистанционного управления (без д/у всегда должен быть выключен)
  10. Включение/выключение режима PULSE
  11. Переключение между режимами TIG и MMA
  12. Переключение между 2-х и 4-х тактным режимом работы
  13. Переключение между постоянным и переменным током (AC/DC)
Особенности аппарата INTER TIG 200 AC/DC PULSE:
  • Аппарат имеет универсальный источник для сварки на постоянном токе TIG DC (5-200А) и для сварки алюминия переменным током TIG AС (20-200А)
  • Полноценно может работать в режиме MMA
  • Способен компенсировать нестабильную сеть 220В в пределах ±15%
  • Имеет 2-х и 4-х тактный режимы работы,что особенно удобно при продолжительной работе
  • Регулировка длительности продувки после сварки позволяет получить идеальный по качеству шов
  • Ругулировка частоты в режиме PULSE позволяет подобрать оптимальный режим работы.
  •  

Характеристики

Напряжение питающей сети220 В
Потребляемая мощность4.5 кВт
Диапазон сварочного тока5-200 А
Потребляемый ток28.2 А
ПВ (продолжительность включения)60 %
Максимальный сварочный ток200 А
Минимальный сварочный ток5 А
Напряжение холостого хода56 В
Поджиг дугивысокочастотный
Разъем для пульта ДУда
Регулировка времени нарастания токаесть
Регулировка баланса полярностиесть
Регулировка времени спада токаесть
Продувка после сварки1-10 сек
Режим импульсной сваркиесть
«Режим AC/DC»есть
Режимы управления циклом сварки2T и 4T
Режим «ММА Сварка»есть
Диапазон регулирования сварочного тока в режиме MMA10-200 А
Синергетическое управлениенет
Комплект кабелейесть
Класс защитыIP21
Габариты498x328x302 мм
Вес20 кг
Возможность сертификации «НАКС»есть
  • аргонодуговая горелка TIG 26, 4 метра
  • держатель электрода 200A + кабель 16мм2, 3 метра
  • зажим на массу 300А + кабель 16мм2, 3 метра

Код товара: 3531

Производитель: Aurora

В магазине: 2 шт.

Есть на складе

Бесплатная доставка по СПб

Уточняйте цену

Оставить заявку

Аппарат аргонодуговой сварки Aurora PRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE (TIG+MMA)

Дополнительная информация

INTER TIG 200 AC/DC PULSE — самый популярный аппарат для аргоно-дуговой сварки от сети 220В. Предназначен для профессиональной импульсной сварки постоянным и переменны током TIG AC/DC и для полноценной сварки штучным плавящимся электродом MMA, также на постоянном и переменном токе. Имеются все необходимые настройки, с помощью которых можно добиваться самого высокого качества сварки алюминия, стали, нержавейки и любых цветных металлов. На удобной, понятной любому сварщику циклограмме отдельно настраивается режим ПУЛЬС и регулируется каждая стадия сварочного процесса для выполнения максимально широкого круга сварочных задач.  

Внешний вид аппарата:

Панель управления:

  1. стартовый сварочный ток в режиме TIG (Start A), (отображается на дисплее) 
  2. рабочий сварочный ток в режиме TIG и MMA (Welding A), (не отображается на дисплее) 
  3. регулировка нижнего уровня сварочного тока для пульса  (Back ground A)
  4. регулировка заварки кратера (Down Slope), (работает только в 4Т режиме) 
  5. регулировка частоты пульса (Pulse Frequency)
  6. регулировка баланса пульса (Pulse Width)
  7. регулировка продувки металла газом после сварки Post Flow (Post Time)
  8. регулировка баланса переменного тока (AC Balance)
  9. включение/выключение дистанционного управления (при работе без д/у переключатель должен быть в положении «OFF»)
  10. включение/выключение режима пульс
  11. переключение между режимами TIG и MMA
  12. переключение между 2-х и 4-х тактными режимами работы
  13. переключение между постоянным и переменным током (AC/DC)

Особенности:

  • универсальный источник для аргонодуговой сварки на постоянном токе TIG DC (5-200А) и для сварки алюминия переменным током TIG AС (20-200А)
  • режим сварки плавящимся электродом MMA на постоянном токе и на переменном токе позволяет работать с любыми типами электродов
  • режим PULSE для работы с материалами разных толщин, для ответственных и декоративных работ
  • интуитивно понятная панель управления для идеальной настройки параметров сварки
  • подключение пульта дистанционного управления ДУ для проведения удаленных работ (опция)
  • высокочастотный бесконтактный поджиг дуги HF
  • работа при пониженном напряжении питающей сети
  • комплект сварочных акссессуаров в стандартной поставке

Применение: 

  • декоративные работы
  • монтажные работы
  • промышленность
  • строительство трубопроводов высокого давления
  • алюминиевые конструкции

Комплектация:

  • горелка TIG 26, 4 метра — 1 шт.
  • кабель 16mm2, 3 метра — 2 шт.
  • держатель электрода 200A — 1шт.
  • зажим на массу 300А — 1 шт.

Габаритные размеры и вес брутто: 610*475*465мм, 29.9кг.

Данный аппарат может быть оснащён педалью управления

Гарантия — 2 года!

Система добровольной сертификации Национального Агентства Контроля Сварки (НАКС) — позволяет получить документ государственного образца, который разрешает использование сварочного оборудования в условиях опасных производственных объектов (ПТО, КО, ГО, НГДО, ОХНВП, СК). Работы на подобных предприятиях должны производиться исключительно аттестованным персоналом с использованием проверенного оборудования и материалов.

Приобретая аппарат AuroraPRO с сертификатом НАКС у нас, Вы также экономите значительные средства, так как самостоятельное прохождение аттестации гораздо дольше по срокам и выше по стоимости.

Aurora PRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE

Современный аппарат AURORA PRO INTER TIG 200 ACDC PULSE относится к серии профессиональных универсальных сварочных инверторов для TIG AC/DC сварки. Кроме режима аргонодуговой сварки, данное устройство поддерживает ММА сварку покрытым электродом. Современная инверторная схема управления, бесконтактный розжиг дуги, обеспечивают уверенную сварку как на минимальных от 5 ампер, так и на максимальных токах до 200 ампер. Возможность выполнять сварку в режиме AC/DC, импульсный режим сварки позволяют сваривать разные типы металлов, цветных и черных, а также сплавов на их основе. Полный комплекс настроек на панели управления с информативной циклограммой создают удобства при подготовке инвертора к работе. Аппарат успешно применяется для решения производственных задач, в ремонтных мастерских, в строительной сфере и быту.

TIG сварка на постоянном токе

При работе инвертора AURORA PRO INTER TIG 200 ACDC PULSE в режиме TIG DC на постоянном токе доступна качественная сварка изделий из нержавеющих сталей и других металлов. Широкий диапазон тока от 5 до 200 ампер обеспечивает возможность сваривать как толстостенные, так и листовые металлы. В данном режиме сварщик может выставить время розжига дуги, величину сварочного тока, величину пускового тока и тока затухания. Благодаря этому достигается высококачественный равномерный провар от начала и до конца шва. Также доступна настройка финишной продувки газом, чтобы исключить коробление и окисления шва в конце цикла.

TIG сварка на переменном токе

Универсальный аппарат AURORA PRO INTER TIG 200 ACDC PULSE поддерживает качественную TIG сварку на переменном токе. Данный режим используется для профессиональной сварки изделий из алюминия и его сплавов. При аргонодуговой сварке на переменном токе происходит чередования циклов постоянного и переменного тока, что позволяет добиться очистки тугоплавкой пленки с поверхности металла и обеспечить глубокий качественный провар. Чтобы исключить перегрев электрода при работе в минусовом диапазоне, доступна настройка баланса тока. Благодаря этому достигается не только высокий ресурс сварочного электрода, но и оптимальные сварочные параметры минусового и плюсового тока.

Импульсный режим сварки

Наличие в сварочном аппарате AURORA PRO INTER TIG 200 ACDC PULSE импульсного режима сварки значительно расширяет его сферу использования. Сварка в режиме PULSE позволяет добиться идеального провара листовых и тонкостенных металлов, обрабатывать декоративные изделия с высоким качеством провара без брака. В данном режиме сварщик может выставить длительность импульса, величину тока в каждом из периодов, а также паузу между импульсами. Благодаря этому достигаются идеальные сварочные параметры для разных сварочных задач.

Режим 2Т/4Т

В режим TIG при постоянном или переменном токе сварщик может отрегулировать работу сварочной горелки в режиме 2Т или 4Т. Для этого достаточно нажать кнопку на панели управления в требуемое положение. При активации режима 2Т не доступна настройка затухания и стартового тока, можно выставить только величину основного тока сварки. Данный режим используется для выполнения аккуратных швов небольшой протяженности, так как розжиг, горение и затухание дуги осуществляется только при нажатой кнопке на горелке. Благодаря этому сварщик полностью контролирует весь процесс от начала и до конца. В режиме 4Т, можно настроить стартовый ток, ток заварки кратера и основной ток. Данный режим используется для работы с длинными швами. При нажатии кнопки произойдет розжиг дуги, при ее отпускании величина тока увеличиться до основного значения. При повторном нажатии ток снизится до установленного тока заварки кратера и при отпускании кнопки дуга погаснет. Благодаря режиму 4Т сварщику не требуется постоянно удерживать кнопку горелки нажатой, что повышает его концентрацию и снижает усталость.

Режим ММА

На панели управления AURORA PRO INTER TIG 200 ACDC PULSE можно выбрать режим ручной дуговой сварки ММА. При этом диапазон сварочного тока составит 5-200 ампер, как и в режиме TIG сварки. Режим ручной дуговой сварки особенно полезный для быстрого соединения изделий из черных металлов, некоторых марок сталей и сплавов. Доступна сварка покрытыми электродами сечением от 1,6 до 4 миллиметров, что позволяет сваривать изделия толщиной от 1 до 10 миллиметров.

Информативная панель управления

Процесс настройки AURORA PRO INTER TIG 200 ACDC PULSE не займет у сварщика много времени благодаря продуманной и удобной панели управления. Для каждого режима сварки и функции предусмотрен отдельный регулятор или тумблер. Благодаря этому мы получаем прямой доступ к требуемой настройке. На цифровом дисплее будут отображаться основные изменяемые параметры. Опционально к аппарату можно купить пульт управления, который позволяет дистанционно изменять основные настройки. Благодаря этому значительно расширяется рабочая зона сварочного аппарата. За охлаждение отвечает встроенный мощный вентилятор и отверстия на корпусе для отвода горячего воздуха. Безопасность сварщика и элементной базы обеспечивает  защита от перегрева, поражения током и перегрузки. Благодаря компактным размерам и небольшому весу инвертор удобен при переноске и эксплуатации.

Особенности:

  • режим сварки TIG AC на переменном токе;
  • режим сварки TIG DC на постоянном токе;
  • сварка алюминия и цветных металлов;
  • HF бесконтактный розжиг дуги;
  • импульсный режим сварки Pulse;
  • режим 2Т/4Т;
  • ММА режим сварки;
  • настройка стартового тока заварки кратера;
  • настройка баланса тока и финишной продувки газом;
  • настройка частоты тока и тока паузы;
  • диапазон тока  5-200 ампер;
  • информативная панель управления;
  • небольшие размеры;
  • стабильная сварка при перепадах напряжения в электросети.

Комплектация:

  • кабель 16mm², 3 метра — 2 шт.;
  • горелка TIG 26, 4 метра — 1 шт.;
  • зажим на массу 300А — 1 шт.;
  • держатель электрода 200A — 1шт.

 

Характеристики Aurora PRO INTER TIG 200 AC/DC PULSE

Основные параметры

Напряжение сети: 220 В
Ток в режиме TIG: 10 — 200 А
Напряжение холостого хода: ?

Напряжение холостого хода (В) – напряжение, подающееся на деталь перед тем, как вы преступите к сварке. Данный параметр влияет на скорость и безопасность возбуждения дуги. Чем выше его значение, тем быстрее и легче происходит возбуждение дуги, но больше опасность поражения электрическим током.

44 В

Дополнительные параметры

Класс защиты: ?

Степень защиты (IP). Этот параметр указывает на степень защищенности сварочного аппарата от воздействия внешних факторов. Чем выше это значение, тем устройство надежней и его можно использовать практически в любых условиях при повышенной влажности или запыленности.

IP 21
Потребляемая мощность: ?

Потребляемая мощность (кВа). Параметр, от которого зависит расход электроэнергии при осуществлении работ и, соответственно, ее стоимость.

5.40 кВА
Рабочая температура: ?

Температурный диапазон работы (°C). Данный параметр определяет допустимый режим эксплуатации сварочного аппарата при минимальных и максимальных температурах. Чем этот диапазон больше, тем надежней устройство и его можно применять как в зимний (особенно холодный), так и в летний (особенно жаркий) периоды.

-20…+50
Артикул: 10052
Габаритные размеры: ?

Габаритные размеры (мм). Габаритные размеры определяют компактность и мобильность устройства. Соответственно, чем они меньше, тем меньше места будет занимать сварочный аппарат, и тем удобней будет с ним передвигаться при работе.

498x328x302
Вес: ?

Вес (кг). Вес сварочного аппарата часто определяет работы, которые с его помощью можно выполнять. Если легкие аппараты можно переносить с места на место (некоторые из них оснащены ремнями для ношения на плече), то более тяжелые модели требуют стационарного расположения. При этом некоторые модели тяжелых аппаратов оснащаются колесами для более удобной транспортировки и пультами дистанционного регулирования сварочных параметров.

27 кг.
Рекомендуемая мощность генератора: ?

Рекомендуемая мощность генератора (кВа). Данный параметр указывает на номинальную мощность генератора, которая потребуется для сварочного аппарата при работе без доступа к электрической сети. Чем меньше этот показатель, тем менее мощный генератор способен поддерживать автономное питание оборудования.

4.96 кВт
Потребляемый ток: ?

Потребляемый ток (А). От этого параметра зависят требования к питающей электросети при осуществлении сварочных работ. К примеру, при сварке электродом диаметром 3 мм потребляемый ток составляет 15-20 А, но уже при сварке электродом диаметром 4 мм этот параметр возрастает до 25-30 А. Поэтому если у вас стоит автомат защиты на 20 А, а потребляемый ток аппарата значительно выше, автомат может выбить во время сварки.

28.20 А
Гарантийный срок: ?

Срок службы (лет). Данный параметр указывает на гарантированный период эксплуатации устройства, который подтвержден заводом изготовителем.

2
ПВ %: ?

Продолжительность нагрузки (%). Данный параметр имеет обозначение «ПН» или «ПВ» и обозначает продолжительность непрерывной работы сварочного устройства при разных нагрузках. Чем выше это значение, тем дольше можно выполнять сварочные работы без дополнительных перерывов.

60

Инициатива AURORA по метастатическому раку молочной железы

Br J Рак. 2014 11 ноября; 111 (10): 1881–1887 гг.

, 1, 2 , 1, 3 , 3 , 1 , 1 , 1 , 1, 3 , 1 , 2 , 1 , 3 , 4 , 5 , 6 , 6 , 6 , 6 , 6 , 6 , 6 , 6 , 7 и 1 , 2, 6, * * D Zardavas

1 Грудиная международная Группа Группы (Big-Aisbl), Брюссель, Бельгия

2 Институт Жюль Бордет, Университет Брюссель, Брюссель, Бельгия

M Maetens

1 Штаб-квартира Международной группы груди (BIG-aisbl), Брюссель, Бельгия

3 Лаборатория трансляционных исследований рака молочной железы – J.C. Heuson, Institut Jules Bordet, Свободный университет Брюсселя, Брюссель, Бельгия

A Irrthum

1 Штаб-квартира Международной группы груди (BIG-aisbl), Брюссель, Бельгия

T Goulioti

19004 Международная группа груди 5 Штаб-квартира (BIG-aisbl), Брюссель, Бельгия

K Engelen

1 Штаб-квартира Международной группы груди (BIG-aisbl), Брюссель, Бельгия

D Фумагалли

1 Штаб-квартира Международной группы груди (BIG-aisbl) , Брюссель, Бельгия

3 Лаборатория трансляционных исследований рака молочной железы – J.C. Heuson, Институт Жюля Борде, Свободный университет Брюсселя, Брюссель, Бельгия

R Salgado

1 Штаб-квартира Международной группы груди (BIG-aisbl), Брюссель, Бельгия

P Aftimos

2

Institutes Bordet , Свободный университет Брюсселя, Брюссель, Бельгия

KS Saini

1 Штаб-квартира Международной группы груди (BIG-aisbl), Брюссель, Бельгия

C Sotiriou

3 Лаборатория трансляционных исследований рака груди J.C. Heuson, Institut Jules Bordet, Свободный университет Брюсселя, Брюссель, Бельгия

P Campbell

4 Проект генома рака, Wellcome Trust Sanger Institute, Hinxton, UK

P Dinh

5 Медицина, онкология, онкология Больница, Пенрит, NSW, Australia

G Von Minckwitz

G Von Minckwitz

6 Грудиная Группа Исполнительный совет

RD Gelber

6 Грудиная Группа Исполнительный совет

м Dowsett

6 Грудиная международная группа

a di leo

6

6 Грудиная Группа Исполнительный совет

D Cameron

0 D Cameron

6 Грудиная международная группа Группа Исполнительный совет

J Baselga

6 Грудиная Группа Исполнительный совет

м Гнант

6 Исполнительный совет Международной группы груди

A Goldhirsch 90 061

6 Исполнительный совет Международной группы груди

L Norton

7 Служба медицины рака молочной железы, Мемориальный онкологический центр Слоан-Кеттеринг, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, США (BIG-aisbl), Брюссель, Бельгия

2 Institut Jules Bordet, Université Libre de Bruxelles, Брюссель, Бельгия

6 Исполнительный совет Breast International Group

1 Штаб-квартира Breast International Group (blBIG-ais) , Брюссель, Бельгия

2 Институт Жюля Борде, Свободный университет Брюсселя, Брюссель, Бельгия

3 Лаборатория трансляционных исследований рака молочной железы – J.C. Heuson, Institut Jules Bordet, Свободный университет Брюсселя, Брюссель, Бельгия

4 Проект генома рака, Wellcome Trust Sanger Institute, Hinxton, UK

5 Медицинская онкология, Nepean Hospital, Penrith, NSW, Australia

6 Исполнительный комитет группы компаний Breast International

7 Служба медицины рака молочной железы, Мемориальный онкологический центр Слоан-Кеттеринг, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, США

Поступила в редакцию 5 февраля 2014 г.; Пересмотрено 13 мая 2014 г.; Принят 26 мая 2014 г.

Эта статья была процитирована другими статьями в PMC.

Abstract

Метастатический рак молочной железы является одной из ведущих причин смертности от рака среди женщин в западном мире. На сегодняшний день большинство исследовательских усилий сосредоточено на молекулярном анализе первичной опухоли для выделения генотипов заболевания. Однако накопленные данные подтверждают молекулярную эволюцию рака молочной железы в течение его жизненного цикла, при этом метастатические поражения приобретают новые молекулярные аберрации. Признавая этот критический пробел в знаниях, Международная группа по вопросам груди запускает AURORA, крупную многонациональную совместную программу молекулярного скрининга метастатического рака молочной железы.Приблизительно 1300 пациенток с метастатическим раком молочной железы, получивших не более одной линии системной терапии по поводу распространенного заболевания, после дачи информированного согласия будут сдавать архивную ткань первичной опухоли, а также будут сдавать ткань, полученную проспективно при биопсии метастатического поражения и крови. . Затем оба типа опухолевой ткани вместе с образцом крови будут подвергнуты секвенированию следующего поколения для панели генов, связанных с раком. Пациентов будут лечить по усмотрению их лечащих врачей в соответствии со стандартной местной практикой, и они будут наблюдать за клиническим исходом в течение 10 лет.В качестве альтернативы, в зависимости от найденных молекулярных профилей, пациенты будут направлены на инновационные клинические испытания, оценивающие молекулярно-направленные агенты. Образцы выпадающих пациентов, считающихся «исключительно реагирующими» или «быстро прогрессирующими» на основании клинического наблюдения, будут подвергнуты более глубокой молекулярной характеристике с целью выявления новых прогностических и прогностических биомаркеров. AURORA, благодаря своему инновационному дизайну, прольет свет на некоторые неизвестные области метастатического рака молочной железы, помогая улучшить клинические результаты пациентов с раком молочной железы.

Ключевые слова: рак молочной железы, метастатический, молекулярное профилирование, целевые клинические испытания, секвенирование следующего поколения подробная молекулярная характеристика рака молочной железы. Неоднократно наблюдаемые результаты исследований с применением этих методов свидетельствуют о широком генетическом разнообразии этого распространенного заболевания, при этом относительно небольшое число генов, связанных с раком, демонстрируют повторяющиеся мутации с высокой частотой (Banerji et al , 2012; Ellis et al , 2012; Koboldt et al. al , 2012; Shah et al , 2012; Stephens et al , 2012).В то же время обширные доклинические исследования привели к разработке молекулярно-направленных противоопухолевых агентов, которые обещают значительно улучшить клинические исходы у пациентов с раком молочной железы. Эти агенты проходят начальную клиническую оценку в основном при наличии метастазов (Saini et al , 2013; Zardavas et al , 2013a). Накопленные научные данные показывают, что такие агенты будут эффективны у пациентов с раком молочной железы, несущих целевые молекулярные аберрации.Действительно, на доклиническом уровне подробная генетическая характеристика обширных коллекций линий раковых клеток человека в сочетании с их фармакологическими профилями позволяет выявить генетические предикторы ответа (Barretina et al. , 2012; Garnett et al. , 2012). Кроме того, появляющиеся данные клинических испытаний, оценивающих таргетные агенты, предоставляют все больше доказательств того, что генетический ландшафт любой данной опухоли будет определять ее профиль чувствительности или резистентности к этим противоопухолевым агентам (Tsimberidou et al , 2012).

Быстро растущий объем данных свидетельствует о том, что как межопухолевая, так и внутриопухолевая генетическая гетерогенность рака молочной железы может быть серьезным препятствием для успешной клинической разработки инновационных противоопухолевых методов лечения. Рак молочной железы все больше фрагментируется на более мелкие молекулярные субпопуляции, и важное значение будет иметь успешное сочетание пациентов с соответствующим целевым лечением, основанным на генотипе их заболевания. Недавние данные подтверждают концепцию о том, что рак молочной железы ведет себя как развивающееся образование, следуя принципам клональной эволюции, при этом метастазы приобретают новые молекулярные аберрации по сравнению с соответствующими первичными опухолями (Ding et al , 2010; Navin et al , 2011). .Эта молекулярная эволюция может усугубляться селективным давлением, оказываемым лечением в течение жизненного цикла заболевания, что приводит к изменению профиля его чувствительности и резистентности к противоопухолевым методам лечения (Duncan et al , 2012).

Важность молекулярной перехарактеристики метастатического рака молочной железы была оценена проспективно (de Dueñas et al , 2014) и недавно была признана в клинических рекомендациях основных онкологических обществ. Руководство Европейского общества медицинской онкологии (ESMO) по клинической практике метастатического рака молочной железы предполагает, что гистопатологическое подтверждение следует проводить, особенно в случае изолированного метастатического поражения (Cardoso et al , 2011).Кроме того, в рекомендациях Национальной комплексной онкологической сети (NCCN) рекомендуется выполнять биопсию для оценки рецептора эстрогена (ER), рецептора прогестерона (PgR) и рецептора эпидермального фактора роста человека (HER2) при рецидивирующем поражении, если статус этих маркеров в первичной опухоли был либо отрицательным, либо неизвестным (Рекомендации NCCN по лечению рака молочной железы: http://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/breast.pdf).

Несмотря на постоянно растущее признание клинической значимости молекулярной характеристики метастатических поражений при раке молочной железы (Shah et al , 2009; Ding et al , 2010; Navin et al , 2011), большинство исследования молекулярного профилирования, о которых сообщалось до сих пор, оценивали первичные опухоли рака молочной железы, таким образом, не давая нам информации о молекулярной эволюции и ландшафте молекулярных изменений, лежащих в основе метастатического заболевания (Banerji et al , 2012; Curtis et al , 2012; Ellis et al , 2012; Koboldt et al , 2012; Shah et al , 2012; Stephens et al , 2012).Однако раковые клетки способны эволюционировать на молекулярном уровне, адаптируясь к избирательному давлению, создаваемому лечением, как это было показано как в доклинических, так и в клинических условиях (Duncan et al , 2012; Balko et al , 2014). Эта способность адаптироваться приводит к продольной неоднородности опухоли, при этом рак ведет себя как развивающаяся экосистема. С точки зрения твердо установленного триплета биомаркеров, используемых в клиническом ведении пациентов с раком молочной железы, а именно ER/PgR/HER2, многочисленные линии доказательств указывают на соответствующие уровни несоответствия между первичной опухолью и последующим метастатическим заболеванием (Cardoso et al , 2001). ; Liedtke и др. , 2009; Amir и др. , 2012; Lindström и др. , 2012).Что касается недавно выявленных геномных аберраций, наблюдаемых при раке молочной железы, даже для наиболее распространенных из них, таких как мутации PIK3CA , только в нескольких исследованиях изучалась их распространенность при метастатическом заболевании по сравнению с тем, что наблюдается при первичных опухолях (Dupont Jensen ). et al , 2010; Gonzalez-Angulo et al , 2011; Kalinsky et al , 2011; Fumagalli et al , 2013). Чтобы устранить эти важные клинические пробелы, Международная группа груди (BIG), некоммерческая организация для академических исследовательских групп со всего мира, запускает очень амбициозную программу под названием AURORA , направленную на понимание молекулярных аберраций в метастазах. Рак молочной железы.Это большое лонгитюдное когортное исследование с последующими клиническими испытаниями, основанными на биологических факторах, сфокусированными на пациентах с метастатическим раком молочной железы, которые будут проводиться с использованием обширной совместной сети BIG.

Дизайн исследования – цели

AURORA — это многонациональная совместная программа молекулярного профилирования метастатического рака молочной железы. Первоначально 1300 пациентов с метастатическим раком молочной железы, либо впервые диагностированных с метастатическим бременем, либо получающих не более одной линии системного лечения в условиях метастазирования, будут участвовать в большом количестве ведущих европейских больниц ().В настоящее время ожидается участие в программе молекулярного скрининга AURORA следующих стран: Австрия, Бельгия, Финляндия, Франция, Германия, Исландия, Италия, Люксембург, Нидерланды, Польша, Португалия, Испания, Швеция, Швейцария и Великобритания. Позже программа может быть расширена для включения пациентов из других частей мира.

Дизайн кабинета АВРОРА. Сокращения: DCT = последующие клинические испытания; MBC=метастатический рак молочной железы; RNASeq=секвенирование РНК; TGS = целевое секвенирование генов; WES = полноэкзомное секвенирование.

Пациенты, дающие согласие на участие в программе «АВРОРА», должны предоставить следующий биологический материал:

  • Ткань как минимум из одного метастатического очага (по возможности двух или более основных биопсий), либо собранная проспективно, либо из архивных образцов возрастом до 6 месяцев (фиксированная формалином, залитая парафином (FFPE) и замороженная ткань)

  • Архивные образцы ткани FFPE из первичной опухоли обширной целевой панели генов, связанных с раком, в режиме реального времени, а также для секвенирования РНК (RNAseq), выполняемого в центральной лаборатории партиями.Это коммерчески доступная панель из 411 генов (дополнительный рисунок 1), которые, как было показано, изменяются при раке, являются потенциальными факторами онкогенеза и / или потенциально модулируют ответ или отсутствие ответа на несколько противоопухолевых препаратов на рынке. или в настоящее время находится в разработке. Была разработана специализированная ИТ-инфраструктура, позволяющая сообщать результаты врачам. В центральной лаборатории задокументированы процедуры обеспечения и контроля качества, а также утвержденные процедуры анализа для матрицы, которая будет использоваться в программе, при этом BIG проводит регулярные проверки.Пациенты, зарегистрированные в программе AURORA, будут лечиться по выбору лечащего врача в соответствии с местной стандартной практикой. Кроме того, пациентам будет предоставлена ​​возможность участвовать в клинических испытаниях, разработанных BIG или другими организациями на основе генотипа их заболевания. В обоих случаях за пациентами, включенными в AURORA, будут наблюдать с систематическим сбором клинических данных и образцов плазмы и сыворотки каждые 6 месяцев для определения ответа (локально оцениваемого) и конечных точек клинического исхода в течение 10 лет.

    Целями программы АВРОРА являются:

    • Чтобы улучшить наше понимание метастатического рака молочной железы, очертить жизненный цикл его молекулярной эволюции и изучить гетерогенность внутри опухоли с помощью широкомасштабного секвенирования следующего поколения большой панели генов, связанных с раком. В частности, параллельное секвенирование как первичных опухолей, так и их соответствующих метастатических поражений будет информативным в отношении продольной внутриопухолевой гетерогенности, поскольку геномный ландшафт метастатического рака молочной железы будет сравниваться с геномным ландшафтом его первичного предшественника.

    • Для определения потенциальных прогностических биомаркеров ответа и резистентности к широко применяемым противораковым препаратам.

    • Предоставить доказательства, подтверждающие осуществимость глобальной платформы молекулярного скрининга метастатического рака молочной железы.

    • Для выявления пациентов с мутациями-кандидатами в опухолях, которые могут быть сопоставлены с клиническими испытаниями на основе биомаркеров.

    • Для создания новых терапевтических гипотез на основе данных, полученных в результате целенаправленного секвенирования генов.

    • Для определения прогноза пациентов на основе характера и количества геномных аберраций, обнаруженных как в метастатических биоптатах опухоли, так и в архивной ткани первичной опухоли.

    • Соотнести эти геномные аберрации, обнаруженные у пациентов, с конечными точками эффективности (показатель ответа, выживаемость без прогрессирования и общая выживаемость).

    Инновационные клинические испытания

    Вслед за программой AURORA компания BIG запускает инновационные клинические испытания фазы II для оценки новых целевых агентов при метастатическом раке молочной железы либо в виде монотерапии, либо в комбинированных схемах.В отношении этих испытаний можно выделить два различных сценария:

    • Клинические исследования на основе генотипа, в которых пациенты будут подбираться для участия в исследованиях в соответствии с генотипом их заболевания, определенным по результатам целевого секвенирования генов. Эти испытания будут разработаны на основе априорных биологических предположений о специфических молекулярных аберрациях, определяющих чувствительность к таргетным терапевтическим средствам. В гипотетическом сценарии, когда идентифицированы два различных целевых отклонения, дающих право на более чем одно клиническое исследование, решение будет приниматься лечащим врачом на основании остальных характеристик заболевания, статуса пациента и сопутствующих заболеваний, предпочтений пациента и ожидаемых результатов. преимущества, молекулярные характеристики, а именно частота аллелей сообщаемых изменений.

    • Клинические исследования (или не связанные с генотипом), в которых право пациентов на участие будет зависеть от их клинико-патологических характеристик и истории лечения.

    В обоих сценариях, в рамках любого данного исследования, будут следовать независимые процессы утверждения, при этом пациенты должны будут подписать форму информированного согласия, отдельную от той, которая предоставляет доступ к программе AURORA. Для каждого пациента, участвующего в таком исследовании, программа молекулярного скрининга AURORA создаст молекулярный профиль.Эта информация в сочетании с клиническими результатами экспериментального лечения поможет определить биомаркеры ответа и/или устойчивости к агентам, находящимся в стадии клинической разработки. Кроме того, в рамках отдельных испытаний будет разработан сильный трансляционный исследовательский компонент «индивидуализированным» образом, чтобы максимизировать получаемые клинически значимые знания. Собранный обширный биологический материал будет подвергнут дальнейшему молекулярному анализу, включая исследование мутаций в плазме и обнаружение, а также молекулярное профилирование циркулирующих опухолевых клеток.Эти дальнейшие анализы будут проводиться не в рамках протокола AURORA, а в контексте последующих трансляционных исследований. Таким образом, AURORA будет служить фильтром молекулярного скрининга, направляя пациентов с метастатическим раком молочной железы к инновационным клиническим испытаниям и ускоряя клиническую разработку перспективных таргетных препаратов в соответствующих молекулярных нишах заболевания.

    Более глубокая молекулярная характеристика

    Пациенты, участвующие в программе AURORA, будут получать лечение по усмотрению лечащего врача либо в соответствии со стандартной местной практикой, либо в рамках последующих клинических испытаний по оценке инновационных противоопухолевых препаратов, как уже было описано.В обоих случаях история лечения, статус заболевания и данные о клинических исходах будут проспективно собираться каждые 6 месяцев в электронной форме клинического отчета, разработанной для программы. Для «выпадающих» пациентов, то есть тех, у которых наблюдается исключительный ответ или быстрое прогрессирование, на собранных биологических образцах будет проведена дополнительная углубленная молекулярная характеристика. Члены руководящего комитета AURORA выявят этих пациентов-выбросов; тем не менее, будут использоваться следующие определения: «быстропрогрессирующие» будут первоначально идентифицированы как пациенты, получающие лечение первой или второй линии и прогрессирующие в течение первых 3 месяцев с момента его начала.«Исключительные респондеры» будут первоначально идентифицированы как пациенты, демонстрирующие (почти) полный ответ в течение более 1 года. В частности, парные первичные и метастатические поражения, а также образцы крови будут подвергнуты секвенированию всего экзома в дополнение к секвенированию целевого гена и RNAseq. Только «исключительные ответчики», включенные в последующие клинические испытания, будут иметь право на эту углубленную молекулярную характеристику. Комбинация этих высокопроизводительных методов молекулярной оценки должна позволить нам изучить фенотипические изменения и связанные с ними сигнальные пути, связанные с идентифицированными мутационными паттернами и сигнатурами.

    Важно отметить, что подробное исследование молекулярных характеристик биологических образцов пациентов, испытывающих либо поразительный ответ на любое данное противораковое лечение, либо особенно агрессивное течение болезни, повысит нашу способность идентифицировать биомаркеры чувствительности или резистентности к применяемым терапевтическим средствам. Такие ретроспективные молекулярные анализы образцов опухолей, полученных от пациентов, подвергшихся таргетной терапии, уже привели к идентификации ранее скрытых прогностических биомаркеров других типов рака.Недавним примером является идентификация мутаций TSC1 (комплекс туберозного склероза 1) в качестве предикторов чувствительности к эверолимусу у пациентов с метастатическим уротелиальным раком, поскольку эта молекулярная аберрация была связана со значительным улучшением времени до рецидива при лечении эверолимусом у пациентов. несущие эти мутации по сравнению с их аналогами дикого типа ( P =0,001; Iyer et al. , 2012). Эта методология теперь упоминается как пример «от фенотипа к генотипу».

    Ожидаемые преимущества и проблемы

    AURORA представляет собой крупномасштабную международную инициативу, направленную на улучшение клинического ведения пациентов с метастатическим раком молочной железы. Масштабы этого проекта влекут за собой многочисленные организационные, логистические и технические проблемы. Для решения этих проблем перед запуском AURORA было проведено специальное пилотное исследование с участием 30 пациентов из нескольких европейских больниц, которые предоставили биопсии метастатических поражений и образцы крови. После центральной оценки стандартных биомаркеров (т.e., ER/PgR/HER2), метастатические очаги и образцы крови были подвергнуты секвенированию нового поколения, результаты этих анализов стали доступны в течение максимум 15 рабочих дней после поступления образцов в центральные лаборатории. Следует отметить, что была разработана специализированная ИТ-платформа на базе Интернета для управления различными видами деятельности и поддержки необходимого информационного потока: регистрация пациентов; получение данных из участвующих больниц и центральных лабораторий; биотрекинг образцов; отчеты о молекулярных и патологических результатах клиницистам; и, что важно, автоматическое сопоставление этих результатов с критериями приемлемости клинических испытаний.Эта платформа собирает исходную информацию о клиническом статусе пациента, первичной опухоли и биопсийном метастатическом поражении, а также о предпочтениях пациента, выраженных в форме информированного согласия, относительно будущего повторного контакта и сообщения о вариантах последовательности зародышевой линии. Это также позволяет членам Молекулярного консультативного совета получать доступ к молекулярным данным пациентов и добавлять аннотации, относящиеся к этим данным, такие как дополнительная информация о клинической значимости молекулярных аберраций.Вся эта информация, патология, данные секвенирования и аннотации затем представляются исследователю безопасным, интегрированным и интуитивно понятным способом.

    В рамках программы AURORA мы рассчитываем получить несколько слоев клинически значимых знаний от пациентов с раком молочной железы. Во-первых, молекулярная характеристика первичной опухоли в сочетании с (нео)-адъювантным лечением в анамнезе и информацией о рецидивах обещает сделать выводы, генерирующие гипотезы, с точки зрения прогностических и прогностических биомаркеров на ранней стадии заболевания.Во-вторых, такая информация в сочетании с историей болезни после метастатического рецидива и, в частности, с более глубокой молекулярной характеристикой клинических «выбросов» может привести к аналогичным результатам в условиях метастазирования. В-третьих, последующие клинические испытания ускорят успешную клиническую разработку молекулярно-таргетных агентов в условиях метастазирования. В-четвертых, сочетание молекулярного анализа первичной опухоли и последующего метастатического поражения даст представление о временной внутриопухолевой гетерогенности рака молочной железы.В-пятых, AURORA создаст уникальную клинически и молекулярно аннотированную базу данных 1300 пациентов с метастатическим раком молочной железы с большим количеством биологического материала, хранящегося для будущих исследований с использованием самых современных высокопроизводительных технологий. Наконец, AURORA следует признать ценной образовательной возможностью для ознакомления лечащих врачей с онкологией, основанной на геномике. Через свою обширную совместную сеть AURORA будет знакомить клиницистов из большого количества больниц по всей Европе с отчетами, содержащими геномную информацию, полученную от их пациентов.Кроме того, для клиницистов из участвующих центров станет доступен открытый канал связи со специализированным многопрофильным молекулярным консультативным советом AURORA, который будет поддерживать клиническую интерпретацию результатов геномного профилирования.

    Мы ожидаем, что такая сложная инициатива столкнется с различными проблемами. Во-первых, логистические сложности, лежащие в основе AURORA, представляют собой такую ​​​​проблему, а предшествовавшее этому небольшое предварительное пилотное исследование дало ценные рекомендации.Во-вторых, выбор платформы для молекулярного профилирования является еще одним важным вопросом, поскольку существует растущий репертуар различных вариантов (полный геном, полный экзом или секвенирование целевых панелей генов, с различными платформами, доступными для каждого из них). . Выбор мультиплексных методов тестирования по сравнению с оценкой нескольких отдельных молекулярных аберраций дает неоспоримое преимущество в изучении нескольких изменений в одном образце. Окончательный выбор основан на факторах, связанных с чувствительностью и специфичностью, требованиями к тканям и временем обработки, и это лишь некоторые из них.В-третьих, еще одной проблемой является оценка клинической значимости молекулярной информации, полученной в результате такой инициативы. В AURORA формирование специального молекулярного консультативного совета, состоящего из экспертов из различных дисциплин, таких как (молекулярная) онкология, молекулярная патология, генетика и биоинформатика, является ценным активом программы в этом отношении. В-четвертых, ожидается, что этические проблемы возникнут в связи с любой инициативой, направленной на изучение генетического ландшафта раковых заболеваний, в частности, в отношении оценки изменений зародышевой линии, которые могут иметь значение для членов семей пациентов, подвергнутых секвенированию.В нашей программе мы позволяем пациентам, участвующим в программе AURORA, отказаться от оценки вариантов зародышевой линии. Наконец, как и в случае любой другой исследовательской инициативы, финансирование является серьезной проблемой, поскольку поставщики медицинских услуг не покрывают расходы на интенсивное молекулярное профилирование, предусмотренное для AURORA.

    Заключение

    AURORA — это академическая инициатива, направленная на расширение геномных и клинических знаний, полученных от пациентов с метастатическим раком молочной железы. Подробное молекулярное профилирование рака молочной железы углубляет наше понимание молекулярной биологии, лежащей в основе этого распространенного заболевания, и обещает привести к созданию персонализированной медицины рака (Zardavas et al , 2013b).В настоящее время во всем мире существует множество инициатив, направленных на получение подробной молекулярной характеристики нескольких типов рака (1). Целью таких инициатив является оценка осуществимости и клинической полезности медицины, основанной на геномике, и в конечном итоге внедрение ее в онкологию. Уже сообщалось о первом опыте таких инициатив, что свидетельствует о возможности персонализации лекарств для пациентов с метастатическим раком молочной железы (André et al , 2014).

    Таблица 1

    Отдельные инициативы молекулярное профилирование рака




    Программа Учреждение Тип Рак Количество пациентов Платформа / техника Гены оцененные Опухоль образец Переработка клинических испытаний
    AURORA
    груди Международная группа
    рак молочной железы
    1300
    Ion Proton
    411 генов
    Архив, первичная и метастатическая биопсия кровь
    да


    MD Anderson Cancer Centre
    твердые опухоли
    2500
    PCR РЫБЫ
    10 генов 1 Gene
    Архивная
    Да
    IMPACT
    Memorial Sloan-Kettering Cancer Center
    Солидные опухоли
    200
    NGS
    NA
    Архивная
    Нет
    IMPACT
    Princess Margaret Cancer Center
    Отдельные твердые опухоли
    500
    MiSeq
    25 Гены
    Архивная
    Нет
    MATCH
    Институт исследований рака / Королевский фонд Marsden NHS Trust
    Рак молочной железы
    500
    NGS
    9049 9 Metastatic Biopsy
    Да
    Профиль
    Dana-Farber Институт рака
    S Olid опухоли
    12 980
    OncoMap
    41 Гены
    Архивная
    Нет
    SAFIR-01
    институт Гюстава Русси
    рака молочной железы
    400
    Массив CGH и PCR
    NA 2 гена
    метастатическая биопсия



    Colorectal Cancer
    600 в год
    Relemina Platform
    360 генов
    Архив, первичная (или метастатическая биопсия, если доступно)
    да

    Европейская грудная налокочная платформа и европейская организация для исследований и лечения рака
    рак легких
    NA
    Платформа Illumina
    360 генов
    архив, первичная (или метастатическая биопсия, если доступно)
    да
    Winther Win Consortium солидные опухоли 200 NGS ХНВ CGH нет данных нет данных NA Опухоль и соответствующая нормальная ткань Да

    AURORA — это проект, посвященный метастатическому раку молочной железы, который также направлен на изучение внутриопухолевой гетерогенности заболевания с помощью сопряженного геномного анализа как первичной опухоли, так и метастатического поражения .Клиническая разработка многообещающих целевых противоопухолевых соединений меняет дизайн будущих клинических испытаний. Действительно, от парадигмы дизайна клинических испытаний «один размер подходит всем» постепенно отказываются в пользу клинических испытаний, ориентированных на генотип, с реалистичным предположением, что целевые соединения будут проявлять явную активность против опухолей, несущих целевые молекулярные аберрации (; Sleijfer et al. , 2013). AURORA обещает ускорить успешную клиническую разработку целевых агентов посредством последующих клинических испытаний.В целом программа AURORA благодаря своему инновационному дизайну прольет свет на неизвестные области метастатического рака молочной железы, приблизив клиницистов на несколько шагов к внедрению точной медицины для своих пациентов.

    Таблица 2

    Таблица 2

    Примеры генотиповых клинических испытаний в раке молочной железы

    9048
    этап ( N ) Соединение Молекулярный механизм действий экспериментального препарата Тип заболевания Молекулярная аберрация
    : «NCT01219699»}} NCT01219699
    I (200)
    BYL719
    PI3Kα Ингибитор
    солидных опухолей и ЭР-положительных МБК
    PIK3CA мутации
    { «тип»: «клиническое испытание»,»attrs»:{«text»:»NCT01589861″,»term_id»:»NCT01589861″}}NCT01589861 (PIKHER2)
    I/II (106)
    BKM120
    9 Pan- Ингибитор PI3K
    HER2-амплифицированный MBC
    Потеря PTEN и/или Мутации PIK3CA
    : «NCT01277757»}} NCT01277757
    II (40)
    MK2206
    АКТ Ингибитор
    МВС
    АКТ мутации и / или PIK3CA мутации и / или потеря PTEN
    {«type»:»clinical-trial»,»attrs»:{«text»:»NCT01202591″,»term_id»:»NCT01202591″}}NCT01202591 (GLOW)
    I/II (900)
    AZD4547
    ингибитор FGFR
    ER-положительный MBC
    FGFR1 Усиление
    {«Тип»: «Клинико-испытание», «attrs»: {«Текст»: «NCT02053636»: «NCT02053636», term_id»:»NCT02053636″}}NCT02053636 (FINESSE)
    II (123)
    Люцитаниб
    Ингибитор FGFR
    90 489
    ER-положительный MBC
    FGFR1 амплификация
    {«type»:»clinical-trial»,»attrs»:{«text»:»NCT01670877″,»term_id»:»08NCT01} } NCT01670877 II (29) Neratinib Необратимый EGFR / HER2 Ингибитор HER2 не усиленные MBC ERBB2 Мутации

    Благодарности

    Мы хотели бы выразить нашу искреннюю благодарность груди Фонд исследования рака, Люксембургский онкологический фонд, Бельгийская национальная лотерея, NIF Trust и BIG Against Breast Cancer за поддержку программы AURORA благодаря их щедрости.

    Ссылки

    • Амир Э., Миллер Н., Гедди В., Фридман О., Кассам Ф., Симмонс С., Олдфилд М., Драницарис Г., Томлинсон Г., Лаупасис А., Таннок И.Ф., Клемонс М. Проспективное исследование, оценивающее влияние подтверждения ткани метастазов у ​​больных раком молочной железы. Дж. Клин Онкол. 2012; 30: 587–592. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • André F, Bachelot T, Commo F, Campone M, Arnedos M, Dieras V, Lacroix-Triki M, Lacroix L, Cohen P, Gentien D, Adelaide J, Dalenc Ф., Гонсалвес А., Леви К., Ферреро Х.М., Боннетер Ж., Лефевр К., Хименес М., Филерон Т., Боннефуа Х.Сравнительный массив геномной гибридизации и секвенирование ДНК для прямого лечения метастатического рака молочной железы: многоцентровое проспективное исследование (SAFIR01/UNICANCER) Lancet Oncol. 2014; 15: 267–274. [PubMed] [Google Scholar]
    • Balko JM, Giltnane JM, Wang K, Schwarz LJ, Young CD, Cook RS, Owens P, Sanders ME, Kuba MG, Sánchez V, Kurupi R, Moore PD, Pinto JA, Doimi FD , Гомес Х., Хориучи Д., Гога А., Леманн Б.Д., Бауэр Дж.А., Питенпол Дж.А., Росс Дж.С., Палмер Г.А., Еленский Р., Кронин М., Миллер В.А., Стивенс П.Дж., Артеага К.Л.Молекулярное профилирование остаточного заболевания при тройном негативном раке молочной железы после неоадъювантной химиотерапии позволяет выявить действенные терапевтические мишени. Рак Дисков. 2014;4:232–245. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Banerji S, Cibulskis K, Rangel-Escareno C, Brown KK, Carter SL, Frederick AM, Lawrence MS, Sivachenko AY, Sougnez C, Zou L, Cortes ML, Fernandez -Лопес Дж. К., Пенг С., Ардли К.Г., Оклер Д., Баутиста-Пинья В., Дюк Ф., Фрэнсис Дж., Юнг Дж., Маффуз-Азиз А., Онофрио Р.С., Паркин М., Фо Н.Х., Кинтанар-Хурадо В., Рамос А.Х., Реболлар -Вега Р., Родригес-Куэвас С., Ромеро-Кордоба С.Л., Шумахер С.Е., Странский Н., Томпсон К.М., Урибе-Фигероа Л., Басельга Дж., Берухим Р., Поляк К., Сгрой Д.С., Ричардсон А.Л., Хименес-Санчес Г., Ландер Э.С. , Габриэль С.Б., Гарравей Л.А., Голуб Т.Р., Мелендес-Зайгла Дж., Токер А., Гетц Г., Идальго-Миранда А., Мейерсон М.Анализ последовательности мутаций и транслокаций в подтипах рака молочной железы. Природа. 2012; 486:405–409. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Барретина Дж., Капонигро Г., Странский Н., Венкатесан К., Марголин А.А., Ким С., Уилсон С.Дж., Легар Дж., Крюков Г.В., Сонькин Д., Редди А., Лю М., Мюррей Л., Бергер М.Ф., Монахан Дж.Э., Мораис П., Мельцер Дж., Корейва А., Жане-Вальбуэна Дж., Мапа Ф.А., Тибо Дж., Брик-Фурлонг Э., Раман П., Шипуэй А., Энгельс И.Х., Ченг Дж., Ю Г.К., Ю J, Aspesi P, Jr, de Silva M, Jagtap K, Jones MD, Wang L, Hatton C, Palescandolo E, Gupta S, Mahan S, Sougnez C, Onofrio RC, Liefeld T, MacConaill L, Winckler W, Reich M, Ли Н., Месиров Дж.П., Габриэль С.Б., Гетц Г., Ардли К., Чан В., Майер В.Е., Вебер Б.Л., Портер Дж., Вармут М., Финан П., Харрис Дж.Л., Мейерсон М., Голуб Т.Р., Моррисси М.П., ​​Селлерс В.Р., Шлегель Р. , Гаррауэй, Лос-Анджелес.Энциклопедия раковых клеток позволяет прогнозировать чувствительность к противоопухолевым препаратам. Природа. 2012; 483:603–607. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Cardoso F, Di Leo A, Larsimont D, Gancberg D, Rouas G, Dolci S, Ferreira F, Paesmans M, Piccart M. Evaluation of HER2, p53, bcl- 2, топоизомераза II-альфа, белки теплового шока 27 и 70 при первичном раке молочной железы и метастатических ипсилатеральных подмышечных лимфатических узлах. Энн Онкол. 2001; 12: 615–620. [PubMed] [Google Scholar]
    • Cardoso F, Fallowfield L, Costa A, Castiglione M, Senkus E, От имени Рабочей группы по рекомендациям ESMO Локально рецидивирующий или метастатический рак молочной железы: клинические рекомендации ESMO по диагностике, лечению и последующему вверх.Энн Онкол. 2011;22:vi25–vi30. [PubMed] [Google Scholar]
    • Curtis C, Shah SP, Chin SF, Turashvili G, Rueda OM, Dunning MJ, Speed ​​D, Lynch AG, Samarajiwa S, Yuan Y, Gräf S, Ha G, Haffari G, Bashashati A , Рассел Р., МакКинни С., METABRIC Group. Лангерод А., Грин А., Провенцано Э., Уишарт Г., Пиндер С., Уотсон П., Марковец Ф., Мерфи Л., Эллис И., Пурушотам А., Борресен-Дейл А.Л., Брентон Д.Д., Таваре С., Калдас С., Апарисио С. Геномные и транскриптомная архитектура 2000 опухолей молочной железы выявляет новые подгруппы.Природа. 2012; 486:346–352. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • de Dueñas EM, Hernández AL, Zotano AG, Carrión RMP, López-Muñiz JIC, Novoa SA, Rodríguez AL, Fidalgo JAP, Lozano JF, Gasion OB, Carrascal EC, Капилья А.Х., Лопес-Барахас И.Б., Матеу М.М., де Себальос Рейна М.Х.Л., Феррандо А.О., Ханьес Н.М., Баллерини В.К., Торрес А.А., Каталан Г., Саэнс ДЖАГ, Менхон С., Гонсалес-Ангуло А.М. Проспективная оценка степени конверсии рецепторного статуса между первичным раком молочной железы и метастазами: результаты исследования GEICAM 2009-03 ConvertHER.Лечение рака молочной железы. 2014; 143:507–515. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Ding L, Ellis MJ, Li S, Larson DE, Chen K, Wallis JW, Harris CC, McLellan MD, Fulton RS, Fulton LL, Abbott RM, Hoog J, Дулинг DJ, Кобольдт Д.С., Шмидт Х., Калики Дж., Чжан К., Чен Л., Лин Л., Вендл М.С., МакМайкл Дж.Ф., Магрини В.Дж., Кук Л., МакГрат С.Д., Викери Т.Л., Аппельбаум Э., Дешривер К., Дэвис С., Гуинтоли Т. , Лин Л., Краудер Р., Тао Ю., Снайдер Дж. Э., Смит С. М., Дюкс А. Ф., Сандерсон Г. Е., Пол К. С., Делеханти К. Д., Фроник К. С., Папе К. А., Рид Д. С., Робинсон Д. С., Ходжес Д. С., Ширдинг В., Диз Н. Д., Шен Д., Локк Д.П., Вихерт М.Е., Элдред Дж.М., Пек Дж.Б., Оберкфелл Б.Дж., Лолофи Дж.Т., Ду Ф., Хокинс А.Е., О’Лафлин М.Д., Бернард К.Е., Каннингем М., Эллиотт Г., Мейсон М.Д., Томпсон Д.М., младший, Иванович Д.Л. , Goodfellow PJ, Perou CM, Weinstock GM, Aft R, Watson M, Ley TJ, Wilson RK, Mardis ER.Ремоделирование генома при базальноподобном метастазе рака молочной железы и ксенотрансплантате. Природа. 2010; 464:999–1005. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Duncan JS, Whittle MC, Nakamura K, Abell AN, Midland AA, Zawistowski JS, Johnson NL, Granger DA, Jordan NV, Darr DB, Usary J, Kuan PF, Smalley DM, Major B, He X, Hoadley KA, Zhou B, Sharpless NE, Perou CM, Kim WY, Gomez SM, Chen X, Jin J, Frye SV, Earp HS, Graves LM, Johnson GL. Динамическое перепрограммирование кинома в ответ на целенаправленное ингибирование MEK при тройном негативном раке молочной железы.Клетка. 2012; 149: 307–321. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Dupont Jensen J, Laenkholm AV, Knoop A, Ewertz M, Bandaru R, Liu W, Hackl W, Barrett JC, Gardner H. Мутации PIK3CA могут не соответствовать первичным и соответствующее метастатическое заболевание при раке молочной железы. Клин Рак Рез. 2010; 17: 667–677. [PubMed] [Google Scholar]
    • Эллис М.Дж., Дин Л., Шен Д., Луо Дж., Суман В.Дж., Уоллис Дж.В., Ван Тайн Б.А., Хуг Дж., Гойфон Р.Дж., Гольдштейн Т.К., Нг С., Лин Л., Краудер Р., Снайдер J, Ballman K, Weber J, Chen K, Koboldt DC, Kandoth C, Schierding WS, McMichael JF, Miller CA, Lu C, Harris CC, McLellan MD, Wendl MC, DeSchryver K, Allred DC, Esserman L, Unzeitig G, Маргенталер Дж., Бабьера Г.В., Марком П.К., Гюнтер Дж.М., Лейтч М., Хант К., Олсон Дж., Тао И., Махер К.А., Фултон Л.Л., Фултон Р.С., Харрисон М., Оберкфелл Б., Ду Ф., Деметр Р., Викери Т.Л., Эльхаммали А. , Piwnica-Worms H, McDonald S, Watson M, Dooling DJ, Ota D, Chang LW, Bose R, Ley TJ, Piwnica-Worms D, Stuart JM, Wilson RK, Mardis ER.Полногеномный анализ дает информацию о реакции рака молочной железы на ингибирование ароматазы. Природа. 2012; 486 (7403:353–360. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Fumagalli D, Salgado R, Criscitiello C, Pugliano L, Laios I, Wilson T, Larsimont D, Piccart M, Michiels S , Lackner MR, Sotiriou C, Loi S. 2013 Использование мутационного профилирования метастатического рака молочной железы ER+/HER2- и сосуществование KRAS, MET, BRAF и FGFR3 с мутациями PIK3CA J Clin Oncol 312013 (приложение; абзац 11003). [Google Scholar]
    • Garnett MJ, Edelman EJ, Heidorn SJ, Greenman CD, Dastur A, Lau KW, Greninger P, Thompson IR, Luo X, Soares J, Liu Q, Iorio F, Surdez D, Chen L, Milano RJ, Bignell Г.Р., Тэм А.Т., Дэвис Х., Стивенсон Дж.А., Барторп С., Лутц С.Р., Когера Ф., Лоуренс К., Макларен-Дуглас А., Митропулос Х., Мироненко Т., Ти Х., Ричардсон Л., Чжоу В., Джуитт Ф., Чжан Т., О. ‘Брайен П., Бойсвер Дж.Л., Прайс С., Хур В., Ян В., Дэн Х., Батлер А., Чой Х.Г., Чанг Дж.В., Басельга Дж., Стаменкович И., Энгельман Дж.А., Шарма С.В., Делаттре О., Саес-Родригес Дж., Грей Н.С. , Settleman J, Futreal PA, Haber DA, Stratton MR, Ramaswa мой S, McDermott U, Benes CH.Систематическая идентификация геномных маркеров лекарственной чувствительности раковых клеток. Природа. 2012; 483: 570–575. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Gonzalez-Angulo AM, Ferrer-Lozano J, Stemke-Hale K, Sahin A, Liu S, Barrera JA, Burgues O, Lluch AM, Chen H, Hortobagyi GN, Миллс Г.Б., Мерик-Бернстам Ф. Мутации пути PI3K и уровни PTEN при первичном и метастатическом раке молочной железы. Мол Рак Тер. 2011;10:1093–1101. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Iyer G, Hanrahan AJ, Milowsky MI, Al-Ahmadie H, Scott SN, Janakiraman M, Pirun M, Sander C, Socci ND, Ostrovnaya I, Viale A, Heguy А., Пэн Л., Чан Т.А., Бохнер Б., Баджорин Д.Ф., Бергер М.Ф., Тейлор Б.С., Солит Д.Б.Секвенирование генома определяет основу чувствительности к эверолимусу. Наука. 2012;338:221. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Kalinsky K, Heguy A, Bhanot UK, Patil S, Moynahan ME. Мутации PIK3CA редко демонстрируют генотипическую внутриопухолевую гетерогенность и выбираются для прогрессирования рака молочной железы. Лечение рака молочной железы. 2011;129:635–643. [PubMed] [Google Scholar]
    • Кобольдт Д.С., Фултон Р.С., Маклеллан М.Д., Шмидт Х., Калики-Вейзер Дж., МакМайкл Дж.Ф., Фултон Л.Л., Дулинг Д.Дж., Дин Л., Мардис Э.Р., Уилсон Р.К., Элли А., Баласундарам М., Баттерфилд Ю.С.Н., Карлсен Р., Картер С., Чу А., Чуа Э., Чун Х-Дж.Э., Куп Р.Дж.Н., Дхалла Н., Гуин Р., Херст С., Херст М., Холт Р.А., Ли Д., Ли Х.И., Майо М., Мур Р.А., Mungall AJ, Pleasance E, Gordon Robertson A, Schein JE, Shafiei A, Sipahimalani P, Slobodan JR, Stoll D, Tam A, Thiessen N, Varhol RJ, Wye N, Zeng T, Zhao Y, Birol I, Jones SJM, Marra М.А., Черняк А.Д., Саксена Г., Онофрио Р.С., Фо Н.Х., Картер С.Л., Шумахер С.Е., Табак Б., Эрнандес Б., Джентри Дж., Нгуен Х., Креншоу А., Ардли К., Берухим Р., Винклер В., Гетц Г., Габриэль С.Б., Мейерсон М., Чин Л., Пак П.Дж., Кучерлапати Р., Ходли К.А., Тодд Ауман Дж., Фан С., Турман Ю.Дж., Ши И., Ли Л., Топал М.Д., Хе Х, Чао Х.Х., Прат А., Сильва Г.О., Иглесиа М.Д., Чжао W, Usary J, Berg JS, Adams M, Booker J, Wu J, Gulabani A, Bodenheimer T, Hoyle AP, Simons JV, Soloway MG, Mose LE, Jeffer ys SR, Balu S, Parker JS, Neil Hayes D, Perou CM, Malik S, Mahurkar S, Shen H, Weisenberger DJ, Triche T, Jr, Lai PH, Bootwalla MS, Maglinte DT, Berman BP, Van Den Berg DJ, Бейлин С.Б., Лэрд П.В., Крейтон С.Дж., Донехауэр Л.А., Гетц Г., Ноубл М., Воэт Д., Саксена Г., Геленборг Н., ДиКара Д., Чжан Дж., Чжан Х., Ву С.Дж., Инчунь Лю С., Лоуренс М.С., Цзоу Л., Сиваченко A, Lin P, Stojanov P, Jing R, Cho J, Sinha R, Park RW, Nazaire MD, Robinson J, Thorvaldsdottir H, Mesirov J, Park PJ, Chin L, Reynolds S, Kreisberg RB, Bernard B, Bressler R, Эрккила Т., Лин Дж., Торссон В., Чжан В., Шмулевич И., Чириелло Г., Вайнхольд Н., Шульц Н., Гао Дж., Черами Э., Гросс Б., Якобсен А., Синха Р., Арман Аксой Б., Антипин Ю., Рева Б., Шен Р., Тейлор Б.С., Ладаньи М., Сандер С., Анур П., Спеллман П.Т., Лу Ю., Лю В., Верхаак Р.Г. Кумбс К., Вайнштейн Д.Н., Хаусслер Д., Бенц К.С., Стюарт Дж.М., Бенц С.К., Чжу Дж., Сето К.С., Скотт Г.К., Яу К., Полл Э.О., Карлин Д., Вонг К. , Соколов А., Тусберг Дж., Муни С., Нг С., Гольдштейн Т.С., Эллротт К., Гриффорд М., Уилкс С., Ма С., Крафт Б., Ян С., Ху Ю., Меерзаман Д., Гастье-Фостер Дж. М., Боуэн Дж., Рамирез Н.С. , Блэк А.Д., Пайетт Р.Е., Уайт П., Змуда Э.Дж., Фрик Дж., Лихтенберг Т.М., Брукенс Р., Джордж М.М., Геркен М.А., Харпер Х.А., Лераас К.М., Уайз Л.Дж., Таблер Т.Р., Макаллистер С., Барр Т., Харт-Котари М. , Тарвин К., Саллер С., Сандаски Г., Митчелл С., Якокка М.В., Браун Дж., Рабено Б., Червински С., Петрелли Н., Должанский О., Абрамов М., Воронина О., Потапова О., Маркс Дж. Р., Сухорска В. М., Мурава Д., Кайлер В., Иббс М., Корски К., Спихала А., Мурава П., Бжезинский Дж.Дж., Перц Х., Лазняк Р., Тересяк М., Татка Х., Лепоровска Э., Богуш-Черневич М., Малицкий Дж., Мацкевич А., Визнерович М., Ван Ле Х, Коль Б., Вьет Тиен Н., Торп Р., Ван Банг Н., Суссман Х., Дык Фу Б., Хайек Р., Фи Хунг Н., Вьет Фыонг Т., Квайет Тханг Х., Заки Хан К., Пенни Р., Мэллери Д., Керли Э., Шелтон С., Йена П., Ингл Дж. Н., Коуч Ф.Дж., Лингл В.Л., Кинг Т.А., Мария Гонсалес-Ангуло А., Миллс Г.Б., Дайер М.Д., Лю С., Мэн Х, Патанган М., Уолдман Ф., Штёпплер Х., Кимрин Ратмелл В., Торн Л., Хуанг М., Бойс Л., Хилл А., Моррисон К., Гаудиозо К., Бшара В., Дейли К., Эгеа С.К., Пеграм М.Д., Гомес-Фернандес К., Дхир Р. , Бхаргава Р., Бруфски А., Шрайвер К.Д., Хук Дж.А., Ли Кэмпбелл Дж., Мурал Р.Дж., Ху Х, Сомиари С., Ларсон С., Деярмин Б., Квечер Л., Коватич А.Дж., Эллис М.Дж., Кинг Т.А., Ху Х., Коуч Ф.Дж., Мурал Р.Дж., Стрикер Т., Уайт К., Олопаде О., Ингл Д.Н., Луо С., Чен Ю., Маркс М.Р., Уолдман Ф., Визнерович М., Бозе Р., Чанг Л.В., Бек А.Х., Мария Гонсалес-Ангуло А., Пихл Т., Дженсен М. , Сфейр Р., Кан А., Чу А, Котиял П., Ван З., Снайдер Э., Понтиус Дж., Аяла Б., Бэкус М., Уолтон Дж., Бабуд Дж., Бертон Д., Николлс М., Шринивасан Д., Раман Р., Гиршик С., Кигонья П., Алонсо С., Санбхадти Р., Барлетта С., Пот Д., Шет М., Демчок Дж.А., Миллс Шоу К.Р., Ян Л., Эли Г., Фергюсон М.Л., Тарнуцер Р.В., Чжан Дж., Диллон Л.А.Л., Буэтоу К., Филдинг П., Озенбергер Б.А. , Гайер М.С., София Х.Дж., Пальчик Ю.Д.Комплексные молекулярные портреты опухолей молочной железы человека. Природа. 2012; 490:61–70. [Google Scholar]
    • Liedtke C, Broglio K, Moulder S, Hsu L, Kau SW, Symmans WF, Albarracin C, Meric-Bernstam F, Woodward W, Theriault RL, Kiesel L, Hortobagyi GN, Pusztai L, Gonzalez-Angulo ЯВЛЯЮСЬ. Прогностическое влияние несоответствия между измерениями тройных рецепторов при первичном и рецидивирующем раке молочной железы. Энн Онкол. 2009; 20:1953–1958. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Lindström LS, Karlsson E, Wilking UM, Johansson U, Hartman J, Lidbrink EK, Hatschek T, Skoog L, Bergh J.Клинически используемые маркеры рака молочной железы, такие как рецептор эстрогена, рецептор прогестерона и рецептор 2 эпидермального фактора роста человека, нестабильны на протяжении всей прогрессии опухоли. Дж. Клин Онкол. 2012;30:2601–2608. [PubMed] [Google Scholar]
    • Навин Н., Кендалл Дж., Троге Дж., Эндрюс П., Роджерс Л., МакИнду Дж., Кук К., Степански А., Леви Д., Эспозито Д., Мутусвами Л., Красниц А., Маккомби В.Р., Хикс Дж. , Виглер М. Эволюция опухоли, полученная с помощью секвенирования одной клетки. Природа. 2011; 472:90–94. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Саини К.С., Лой С., де Азамбуджа Э., Мецгер-Фильо О, Сайни М.Л., Игнатиадис М., Дэнси Дж.Э., Пиккарт-Гебхарт М.Дж.Ориентация на пути PI3K/AKT/mTOR и Raf/MEK/ERK при лечении рака молочной железы. Cancer Treat Rev. 2013; 39: 935–946. [PubMed] [Google Scholar]
    • Shah SP, Morin RD, Khattra J, Prentice L, Pugh T, Burleigh A, Delaney A, Gelmon K, Guliany R, Senz J, Steidl C, Holt RA, Jones S, Sun M , Леунг Г., Мур Р., Северсон Т., Тейлор Г.А., Тешендорф А.Е., Це К., Турашвили Г., Вархол Р., Уоррен Р.Л., Уотсон П., Чжао Ю., Калдас К., Хантсман Д., Херст М., Марра М.А., Апарисио С. Мутационный эволюция лобулярной опухоли молочной железы, профилированная с разрешением в один нуклеотид.Природа. 2009; 461:809–813. [PubMed] [Google Scholar]
    • Шах С.П., Рот А., Гойя Р., Олоуми А., Ха Г., Чжао Ю., Турашвили Г., Дин Дж., Це К., Хаффари Г., Башашати А., Прентис Л.М., Хаттра Дж., Берли А. , Яп Д., Бернард В., Макферсон А., Шумански К., Крисан А., Джулиани Р., Херави-Муссави А., Рознер Дж., Лай Д., Бирол И., Вархол Р., Там А., Дхалла Н., Зенг Т., Ма К., Чан С.К. , Гриффит М., Морадян А., Ченг С.-В.Г., Морин Г.Б., Уотсон П., Гелмон К., Чиа С., Чин С.Ф., Кертис С., Руэда О.М., Фараон П.Д., Дамараджу С., Макки Дж., Хун К., Харкинс Т., Тадиготла В. , Сигарудиния М., Гаскар П., Тлсти Т., Костелло Дж. Ф., Мейер И. М., Ивз С. Дж., Вассерман В. В., Джонс С., Хантсман Д., Херст М., Калдас С., Марра М. А., Апарисио С.Спектр клональной и мутационной эволюции первичного тройного негативного рака молочной железы. Природа. 2012;486 (7403:395–399. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Sleijfer S, Bogaerts J, Siu LL. Designing преобразующие клинические испытания в эпоху генома рака. J Clin Oncol. 2013;31 : 1834–1841. , Beare D, Butler A, Cheverton A, Gamble J, Hinton J, Jia M, Jayakumar A, Jones D, Latimer C, Lau KW, McLaren S, McBride DJ, Menzies A, Mudie L, Raine K, Rad R, Spencer Чепмен М., Тиг Дж., Истон Д., Лангерод А., OSBREAC.Lee MTM, Shen CY, Tee BTK, Huimin BW, Broeks A, Vargas AC, Turashvili G, Martens J, Fatima A, Miron P, Chin SF, Thomas G, Boyault S, Mariani O, Lakhani SR, van de Vijver M, Вант Веер Л., Фокенс Дж., Десмедт С., Сотириу С., Тутт А., Калдас С., Рейс-Фильо Дж.С., Апарисио САДЖР, Саломон А.В., Бёрресен-Дейл А.Л., Ричардсон А., Кэмпбелл П.Дж., Футреал П.А., Стрэттон М.Р., Каресен Р., Шлихтинг Э., Науме Б., Зауэр Т., Оттестад Л. Ландшафт раковых генов и мутационных процессов при раке молочной железы. Природа. 2012; 486 (7403:400–404.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Цимбериду А.М., Искандер Н.Г., Хонг Д.С., Уилер Дж.Дж., Фалчук ​​Г.С., Фу С., Пиха-Пол С., Наинг А., Янку Ф., Лутра Р., Йе И., Вэнь С., Берри Д., Курцрок Р. Персонализированная медицина в программе клинических испытаний фазы I: инициатива онкологического центра доктора медицины Андерсона. Клин Рак Рез. 2012;18:6373–6383. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Zardavas D, Baselga J, Piccart M. Новые таргетные агенты при метастатическом раке молочной железы. Nat Rev Clin Oncol.2013;10:191–210. [PubMed] [Google Scholar]
    • Zardavas D, Pugliano L, Piccart M. Персонализированная терапия рака молочной железы: мечта или реальность. Онкол будущего. 2013;9:1105–1119. [PubMed] [Google Scholar]

    Динамический механизм аллостерической активации киназы Aurora A путем фосфорилирования петли активации

    Авторы обзора согласны с тем, что это очень подробный анализ динамических характеристик петли активации важной протеинкиназы и, в частности, мотива DFG.Оно является более полным, чем любое предыдущее исследование, а также вводит новые концепции для осмысления этой важной консервативной особенности каждой протеинкиназы. Спектроскопические исследования хорошо сделаны и информативны, а некоторые технологии являются новыми. Однако общая организация документа является недостатком, и основные концепции не были четко сформулированы, а в некоторых случаях кажутся противоречивыми. Самое главное, было ощущение, что мотив DFG нельзя рассматривать независимо от других согласованных и коррелированных движений, которые опосредованы C-спиралью и мотивом Tpx2, который стыкуется непосредственно с C-спиралью.

    Мы никогда не предполагали, что мотив DFG можно рассматривать независимо от движений петли активации и С-спирали. В самом деле, мы принимаем поразительное сходство в данных IR и FRET/EPR, которые все показывают сходные конформационные сдвиги, опосредованные нуклеотидами и Tpx2, как явное указание на то, что конформационные изменения различных структурных элементов тесно связаны в пределах киназного домена. Мы согласны с тем, что С-спираль, вероятно, также связана с этими элементами, но отмечаем, что масштаб конформационных изменений С-спирали в AurA невелик (как и во всей линии AGC из-за сдерживающего влияния В-спираль в этих белках) и, следовательно, сложно измерить напрямую, и поэтому мы полагались на мотив DFG и активационную петлю как на показания общего конформационного состояния киназы.

    Чувствуется, что ключевые вопросы были потеряны при интерпретации результатов и обсуждении. Чтобы представить исправленную рукопись, потребуются серьезные изменения, как указано ниже. Учитывая потенциальную важность этих результатов, мы были бы готовы рассмотреть существенно переработанную рукопись.

    Мы сожалеем, что оригинальная рукопись местами путалась. Мы считаем, что удаление раздела о кинетике, как было предложено рецензентами, и переориентация обсуждения на ключевые структурные вопросы, в частности, на то, как фосфорилирование вызывает структурную перестройку в состоянии DFG-In, упростили исправленную рукопись и улучшили ясность. и сосредоточиться.Мы полагаем, что центральный результат статьи, заключающийся в том, что фосфорилирование изменяет структуру состояния DFG-In, вызывая активацию, теперь сформулирован гораздо более заметно и ясно.

    1) Основное беспокойство связано с относительными ролями Tpx2 и фосфорилирования in vivo. Вы заметили, что Tpx2 действует в митотическом веретене, где киназа остается нефосфорилированной под действием PP6, тогда как активация центросомы происходит за счет фосфорилирования в T288 на петле активации, что подразумевает два различных механизма активации.Не обсуждалось, что на самом деле делает Tpx2 помимо рекрутирования фосфатазы. Ваши исследования, а также более ранняя литература показывают, что Tpx2 и фосфорилирование могут действовать синергетически in vitro, но не совсем ясно, может ли фосфорилирование само по себе или другой фактор, выполняющий роль, подобную Tpx2, действовать на центросому. Пересмотренная рукопись потребует четкого механистического обсуждения роли фосфорилирования петли активации и стыковки Tpx2 с C-спиралью, которые являются коррелированными движениями.

    Рецензенты поднимают хороший вопрос. Наше утверждение о том, что роли Tpx2 и фосфорилирования в значительной степени независимы in vivo, было основано на значительной предыдущей работе других лабораторий. Напр., работа Toya et al., 2011 показала, что AurA, ассоциированный с веретеном, не фосфорилируется на T288 и что мутантный T288A AurA не блокирует функции веретена. Кроме того, работа Zeng et al., 2010 подтвердила, что основная популяция AurA на веретене не фосфорилирована на T288 из-за действия фосфатазы PP6.Сходным образом исследования локализации и нокдаунов Tpx2 (Kufer et al., 2002) показали, что Tpx2 не присутствует в центросоме, не взаимодействует с центросомной AurA и не требуется для ее центросомной локализации и функции. Эти исследования in vivo легли в основу нашего утверждения о том, что два механизма активации независимы. Мы отредактировали раздел «Введение», чтобы более четко описать эти моменты.

    Мы согласны с авторами обзора в том, что наши биохимические данные, демонстрирующие поразительную синергию между Tpx2 и фосфорилированием, могут показаться загадочными в свете работы in vivo и потенциально могут указывать на существование небольшого, но функционально важного клеточного пула AurA, который активируется как Tpx2, так и фосфорилирование.В свете этого мы смягчили утверждение о независимости механизмов Tpx2 и фосфорилирования в пересмотренном разделе «Обсуждение». Тем не менее, мы отмечаем, что наличие как синергии, так и независимости в действиях Tpx2 и фосфорилировании ранее сообщалось Dodson and Bayliss, 2012 («Активация киназы Aurora-A путем связывания и фосфорилирования белков-партнеров независима и синергична»). Теперь мы включаем новый раздел в конце результатов, в котором описывается, как наша модель нового аутоингибированного подсостояния DFG-In дает объяснение синергии: нарушение аутоингибированного состояния фосфорилированием способствует сборке сайта связывания Tpx2.

    Наконец, мы внесли дополнительные поправки в раздел «Обсуждение» рукописи, чтобы сделать следующую важную связь с родственными киназами семейства AGC и нашей предыдущей работой, которая обеспечивает некоторый контекст для рассмотрения относительного синергизма по сравнению с независимостью фосфорилирования и Tpx2. Наша предыдущая работа (Cyphers et al., 2017) показала, что способность AurA сильно активироваться либо только фосфорилированием, либо только Tpx2 (по крайней мере, in vitro) была обусловлена ​​усиленным регуляторным стержнем в линии киназы Aurora с участием уникального полярный остаток, который координирует опосредованную водой сеть водородных связей в активном центре.Мы показали, что удаление этой особенности путем мутагенеза, по существу превращающего AurA в AGC-подобную киназу, предотвращает индивидуальную активацию AurA путем фосфорилирования или только Tpx2, так что для активации требуются оба одновременно. Это аналогично ситуации, обнаруженной в киназах AGC, где задействование гидрофобного мотива и фосфорилирование происходят как согласованный процесс активации. Мы считаем вероятным, что появление уникальной сети водородных связей в AurA было необходимо для обеспечения независимой активации пулов AurA, связанных с веретеном и центросомой.Теперь мы включили обсуждение этого вопроса в исправленную рукопись.

    Мы определенно согласны с обозревателями в том, что существование Tpx2-подобного элемента, который дополнительно модулирует активность AurA в центросоме, возможно; хотя идентификация этого выходит за рамки этой работы, мы упомянули возможность дальнейшей модуляции центросомной AurA с помощью белок-белковых взаимодействий в пересмотренном разделе «Обсуждение».

    2) Рецензенты считают, что кинетические данные в последней части статьи не являются особенно надежными.Например, эксперименты с остановленным потоком приводят к модели, согласно которой конфигурация DFG-Out необходима для высвобождения нуклеотидов и может быть промежуточным этапом в каталитическом цикле. Однако эти эксперименты проводились в отсутствие пептидного субстрата. Что происходит в условиях присутствия пептида? В целом аргументы относительно возможной роли «внешней» конформации в высвобождении нуклеотидов недостаточно обоснованы, поэтому мы просим исключить эти части из рукописи, если только они не будут подкреплены более обширными измерениями с пептидным субстратом.

    Мы согласны с рецензентами в том, что кинетические данные были слабым местом оригинальной статьи. Хотя мы утверждаем, что вопрос о функциональной роли большой DFG-Out субпопуляции фосфорилированного AurA является важным и интересным вопросом, мы согласны с тем, что он выходит за рамки настоящей работы и что включение кинетических данных излишне усложняет задачу. рукопись и привело к путанице. Поэтому мы решили удалить кинетический раздел и переориентировать рукопись на ключевые структурные эффекты фосфорилирования.

    3) Сегмент активации явно служит для активации киназ, но фосфорилирование также обеспечивает место стыковки субстратов. Вполне возможно, что связывание определенного субстрата будет дополнительно стабилизировать конформацию DFG-in, и этот эффект может зависеть от конкретного субстрата. MYC, например, недавно был описан как субстрат, взаимодействие которого зависит от конформации DFG (его замещают ингибиторы DFG-out). Таким образом, вполне вероятно, что динамические свойства изменятся в присутствии конкретных субстратов.

    Рецензенты отмечают превосходную точку зрения на потенциальную роль субстратов в модулировании конформации AurA. Мы провели несколько экспериментов, пытаясь проанализировать влияние связывания субстрата на конформационную динамику AurA. К сожалению, доступные консенсусные субстратные пептиды для AurA относительно бедны, с измеренными значениями Km в миллимолярном диапазоне. Фактически мы провели эксперименты IR, FRET и EPR в присутствии 10 мМ субстратного пептида кемптида, который соответствует консенсусной последовательности, определенной для AurA Ferrari et al., 2005, и не обнаружили влияния на конформацию киназы при использовании любого из этих методов. Мы включили данные ЭПР в исправленную статью (рис. 4 — дополнение к рисунку 2В). Мы считаем вероятным, что распознавание субстрата на самом деле является временным, при этом субстрат диффундирует в активный центр и слабо и кратковременно взаимодействует с киназой.

    Мы отмечаем, что MYCN фактически связывается как псевдосубстрат с AurA, и хотя он прочно связывается и действительно захватывает киназу в активном состоянии, как показано в работе Richards et al., 2016, важно понимать, что это связывание является некаталитической функцией каркаса AurA и не отражает нормальное взаимодействие киназы: субстрата.

    4) Другая проблема заключается в том, что здесь использовался АДФ, а не АТФ; это удобно, так как АТФ, вероятно, приведет к дополнительному аутофосфорилированию во время измерений. Однако γ-фосфат, как и второй ион металла, образует важные взаимодействия с DFG и почти наверняка будет влиять на его динамические свойства, особенно если фосфатаза также находится поблизости.Концентрации АДФ (50–100 мкМ) значительно ниже, чем концентрации АТФ (1–5 мМ) в клетках. Хотя AMP-PNP, негидролизуемый аналог АТФ, может не полностью имитировать АТФ, он был бы лучше, чем АДФ. Почему его не использовали? Эти вопросы следует обсудить, чтобы решить проблему, связанную с тем, что предлагаемая модель более актуальна, чем просто для изучаемых здесь узких условий.

    Мы включили эксперименты FRET в стационарном состоянии с AMPPNP в исходную рукопись и получили результаты, очень похожие на результаты с ADP.Однако, учитывая важность этого вопроса, мы согласились с рецензентами, что нам необходимо повторить и другие эксперименты с AMPPNP. Теперь мы повторили эксперименты FRET и DEER с временным разрешением с AMPPNP и наблюдаем результаты, очень похожие на результаты, полученные с ADP (рис. 2 и рис. 4 — дополнение к рисунку 2A). В частности, эксперименты DEER с AMPPNP прекрасно подтверждают, что один только нуклеотид не переводит полностью ни фосфорилированный, ни нефосфорилированный AurA в состояние DFG-In, и что для этого в обоих случаях требуется Tpx2 (рис. 4 — дополнение к рисунку 2A).Это сравнение между нефосфорилированным и фосфорилированным AurA, связанным с AMPPNP, еще раз подчеркивает, что фосфорилирование действительно приводит к небольшому увеличению выборки спин-спиновых расстояний свыше 50 ангстрем, как указано рецензентами в пункте 5 ниже. Как обсуждается в ответе ниже, этот результат согласуется с нашей моделью, согласно которой структура состояния DFG-In изменяется в результате фосфорилирования таким образом, что оно вносит вклад в распределение расстояний между спинами и спинами около 52 ангстрем, а не на расстояние около 49 ангстрем в отсутствие фосфорилирования.

    Хотя может показаться удивительным, что координация Mg-ATP с помощью DFG Aspartate не захватывает киназу в состоянии DFG-In, возможно, это имеет смысл с точки зрения использования равновесия DFG для регуляторного контроля, как это делает Tpx2. Если бы связывание АТФ было тесно связано с равновесием DFG, то высокая концентрация АТФ в клетке заставляла бы AurA переходить в состояние DFG-In, подавляя любую способность Tpx2 или других факторов влиять на равновесие DFG. Вместо этого природа гарантировала, что нуклеотид лишь слабо связан с равновесием DFG, так что связывание и высвобождение могут происходить без нарушения регуляторного статуса фермента.

    5) Вывод о том, что популяция DFG-In не изменяется при фосфорилировании, частично основан на данных меченного нитрилом Q185C на рисунке 1. Однако Dodson and Bayliss, 2012 показали, что меченый Q185C имеет очень небольшую активность без Tpx2. Так могут ли они быть уверены, что эти данные отражают нативный фермент, а не артефакт мутации/мечения? Данные о популяции, полученные с помощью trFRET, выглядят в этом отношении более убедительными, поскольку они показывают, что маркировка оказывает умеренное влияние на активность.С другой стороны, с данными DEER, более широкое распределение phos+ADP по сравнению с unphos+ADP на рисунке 3A предполагает степень смещения популяции и включает некоторые виды вокруг пика 52 Å, обнаруженного с Tpx2. Что произойдет, если авторы попытаются подогнать гауссианы вокруг основных пиков? В целом существует ряд несоответствий в различных наборах экспериментов. Как указано выше, введение кинетических данных в отличие от данных стационарного состояния только добавляет путаницы.

    Рецензенты абсолютно правы в том, что киназная активность фермента, модифицированного нитрилом, минимальна без Tpx2, и что в принципе это может быть признаком вредного влияния мечения на конформационное равновесие.В самом деле, мы не стремимся сделать вывод исключительно из данных IR, что равновесие DFG не смещается при фосфорилировании. Однако конформация мотива DFG тесно связана с конформацией петли активации, что подтверждается многочисленными рентгеновскими структурами киназ, а также нашими результатами с Tpx2, а данные TR-FRET и DEER подтверждают интерпретацию что фосфорилирование оказывает минимальное влияние на конформационное равновесие петли активации. Действительно, небольшая разница между распределениями DEER AurA:ADP с фосфорилированием и без него, упомянутая рецензентами (см. рис. 4B пересмотренной рукописи), на самом деле может быть объяснена различными структурами состояния DFG-In в двух случаях, как хорошо продемонстрировано нашими экспериментами с SNS-314 (рис. 4E): состояние DFG-in фосфорилированного AurA вносит вклад в спин-спиновое расстояние ~ 52-53 ангстрем к распределению расстояний, тогда как состояние DFG-in нефосфорилированного AurA вместо этого составляет расстояние 49 Å.Новые эксперименты с AMPPNP, включенные в пересмотренную рукопись, еще больше подтверждают этот результат (см. Рисунок 4 — дополнение к рисунку 2A, где более темно-синий оттенок подчеркивает увеличенную выборку расстояний свыше 50 ангстрем в фосфорилированном образце). Мы сожалеем, что это не было ясно в исходной рукописи, а в исправленной рукописи мы объединили данные ЭПР в одну цифру и сильно отредактировали обсуждение данных, чтобы подчеркнуть этот критический момент. Мы также дополнительно подтвердили структурные изменения, вызванные фосфорилированием, в состоянии DFG-In, используя отдельную серию экспериментов DEER, в которых одна из спин-меток была перемещена на S283 (вместо S284), а SNS-314 снова использовался для выделения DFG-в состоянии.Эти данные подтверждают, что фосфорилирование вызывает выраженные структурные изменения в состоянии DFG-In (рис. 4 — дополнение к рис. 3).

    Мы согласны с тем, что включение кинетических данных привело к путанице, поэтому удалили этот раздел из пересмотренной рукописи и переориентировали обсуждение на то, как фосфорилирование изменяет структуру DFG-in состояния AurA, чтобы активировать киназу, центральный вывод этого исследования. работай.

    Мы попытались подогнать распределения расстояний к функциям Гаусса, как было предложено рецензентами, чтобы оценить степень заполнения состояний DFG-Out и DFG-In в каждой выборке.Однако из-за сложности распределений расстояний, полученных по Тихонову, с тремя-четырьмя отдельными пиками, вносимыми каждым структурным состоянием из-за альтернативных ротамеров спиновых зондов, эта процедура подбора проблематична, и мы не нашли результаты очень надежными. или информативный. Вместо этого мы решили сосредоточиться на более качественных описаниях распределений, которые, тем не менее, служат для иллюстрации основных моментов: а) конформационный ансамбль фосфорилированного AurA является гетерогенным в отсутствие Tpx2 и б) фосфорилирование изменяет структуру состояния DFG-In как отражается во вкладе расстояния 52 Å в распределение.

    Мы считаем, что в пересмотренной рукописи устранены явные несоответствия между различными методами. В частности, все три экспериментальных метода убедительно подтверждают следующие ключевые наблюдения:

    A) Нефосфорилированный и фосфорилированный AurA находятся в сходном конформационном равновесии между состояниями DFG-Out и DFG-In.

    B) Связывание Tpx2 необходимо как для нефосфорилированного, так и для фосфорилированного AurA, чтобы гомогенно принять состояние DFG-In.

    6) Более четкая ссылка на более раннюю валидацию спектроскопических методов, включая влияние (или отсутствие такового) на активность ферментов при введении цистеинов и зондов, использование АДФ по сравнению сАТФ в качестве кофактора и т. д. должны быть обеспечены. Какие новые методы и данные вводятся здесь?

    Мы отредактировали рукопись, чтобы убедиться, что данные проверки четко представлены, а предыдущая работа надлежащим образом цитируется. Мы теперь включили дополнительную информацию о приготовлении фосфорилированной формы Q185CN AurA для IR на рисунке 1 — дополнение к рисунку 1, и в интересах полного раскрытия добавили предложение к подписи к рисунку, подчеркивающее существенно сниженную киназную активность этого образца. наблюдается в отсутствие Tpx2, что также показано на рисунке.Мы считаем, что тот факт, что включение флуоресцентных красителей и спин-меток очень мало влияет на активность киназы, является основным преимуществом анализа, подтверждающим достоверность этой истории. Дополнительным важным моментом является значительная валидация Cys-lite конструкции AurA, выполненная группой Ричарда Бейлисса, включая валидацию киназной активности (Rowan et al., 2013) и анализ того, как мутация C290A упрощает картину фосфорилирования, полученную во время рекомбинантная экспрессия в E.coli , и кристаллическая структура конструкции Cys-lite, определенная Burgess et al., 2015, которая практически неотличима от WT. Мы уже упоминали об этих достижениях в разделе «Материалы и методы».

    7) Утверждение, что регуляция Aurora A путем фосфорилирования и Tpx2 обычно взаимоисключающие, является упрощением, которое не подтверждается вашими данными. Без дополнительных данных и информации о временных масштабах и физиологических партнерах Авроры А в различных условиях это утверждение кажется чрезмерным упрощением.

    Как обсуждалось выше в ответ на пункт 1, мы согласны с тем, что мы, возможно, преувеличили этот момент, который был основан на работе других групп in vivo, а не на наших собственных данных, которые действительно можно рассматривать как потенциально подтверждающие физиологическую роль Tpx2 и фосфорилирование действуют вместе. Мы отредактировали рукопись, чтобы смягчить это утверждение, и удалили фразу «взаимоисключающие». Мы также включили в пересмотренный раздел «Обсуждение» сравнение между механизмами Tpx2/фосфорилирования AurA и механизмами активации родственных киназ семейства AGC.Мы считаем, что это обсуждение помогает поместить нашу работу в контекст и более точно описывает механизмы двойной активации AurA как вариацию на тему, а не как совершенно уникальное свойство.

    8) Другая проблема связана с последним заявлением в обсуждении эволюции киназ. Эволюционное давление на киназы, вероятно, заключается не в том, чтобы оптимизировать каталитическую эффективность (т. е. связывание субстрата и высвобождение продукта), а скорее в том, чтобы оптимизировать регуляцию с помощью механизма переключения, который вы здесь характеризуете.

    Мы согласны с рецензентами в том, что первичное избирательное давление, действующее на киназы, является регулирующим, и в свете удаления раздела о кинетике и переориентации рукописи на структурную историю мы внесли поправки в этот последний раздел Обсуждения. Мы действительно думаем, что потенциальная функция субпопуляции DFG-Out является интригующим вопросом, но согласны с тем, что это следует оставить для будущего анализа.

    [Примечание редактора: перед принятием были запрошены дополнительные изменения, как описано ниже.]

    1) Вопросы, рассмотренные в пункте 3 письма-опровержения, подчеркивают пептидные субстраты и фактически говорят о субстратах, которые, вероятно, диффундируют в активный центр и из него. Эти субстраты слабо связываются (Km 10 мМ), поэтому маловероятно, что они физиологически значимы. Действительно, эксперименты с высокой концентрацией пептида не указывают на изменение конформации активационного сегмента. Важно подчеркнуть, что в клетках субстратами являются не пептиды, а белки, которые часто связаны с сигнальным комплексом мотивами, не находящимися в активном центре.Такие субстраты могут иметь места стыковки, увеличивающие их локальную концентрацию; если они связаны дополнительным сайтом, они не ограничиваются диффузией после активации киназы, даже если она активируется очень кратковременным образом. Авторам следует это прокомментировать, так как вся система может выглядеть иначе, если рассматривать ее как плотно собранный сигнальный комплекс. В этом сценарии очень вероятно, что в митотическом веретене может существовать еще не идентифицированный функциональный эквивалент Tpx2.

    Это отличный момент, и мы внесли поправки в раздел «Обсуждение», включив в него предложение, указывающее, как образование комплексов и стыковка субстрата in vivo могут дополнительно модулировать динамику фосфорилированного фермента.

    2) Авторы отмечают, что MYC связывается как псевдосубстрат с AurA. Однако также было показано, что ингибиторы типа II вытесняют MYC, таким образом, предположительно существует тесная связь между активационным сегментом и связыванием субстрата.Было бы неплохо обсудить это немного подробнее.

    Мы включили упоминание о взаимодействии псевдосубстрата NMYC и о том, как оно модулирует динамику киназы, в пересмотренном разделе «Обсуждение», в том же разделе, где рассматривается более широкий вопрос стыковки субстрата, поднятый в пункте 1.

    3) Авторы утверждают, что «…С-спираль, вероятно, также связана с этими элементами, но мы отмечаем, что масштаб конформационных изменений С-спирали в AurA невелик (как и во всей линии AGC из-за сдерживающего влияния В-спирали в этих белках)».Этого не видно из кристаллических структур, демонстрирующих гибкость спирали альфа-С. По общему признанию, в этих структурах отсутствует N-конец, но если N-конец ограничивает движение альфа-С, это также создает проблему для конструкции, используемой в спектроскопических данных, которая использует аналогичную границу. Авторы должны попытаться решить этот вопрос в ходе обсуждения.

    Мы внесли поправки в раздел «Обсуждение» рукописи, чтобы дополнительно обсудить роль а-С-спирали и то, как она связана с фосфорилированием и связыванием Tpx2.

    Чтобы внести ясность, мы не намеревались выше предположить, что а-С-спираль вообще не движется в AurA, а скорее провести четкое различие между динамикой в ​​киназах AurA/AGC и в классах киназ, таких как CDKs и Src, в котором а-С-спираль подвергается крупномасштабному перемещению в альтернативное, стабильное и густонаселенное аутоингибиторное состояние. Последний способ движения ингибируется В-спиралью в киназах AurA/AGC. Рецензенты совершенно правы в том, что а-С-спираль все же может быть «динамической» в киназах AurA/AGC, о чем свидетельствует беспорядок в кристаллических структурах.Действительно, мы обнаружили эту динамику в нашей более ранней работе по молекулярной динамике (Cyphers et al., 2017) и обнаружили, что она подавляется Tpx2. Меньшая величина движений, характерных для этой последней «динамики», просто затрудняет их экспериментальное изучение, например, с помощью DEER-спектроскопии, поэтому мы не измеряли эту динамику экспериментально. Это было бы интересной темой для будущей работы, но явно выходит за рамки текущего исследования.

    4) Синергизм между двумя областями — сайтом стыковки TPX2 (называемым гидрофобным мотивом в других киназах AGC) и петлей активации — это увлекательный вывод.Хотя эта синергия имеет решающее значение для всех киназ и строго регулируется, ее нелегко отследить в других киназах. Aurora A с ее транс-механизмом стыковки с гидрофобным мотивом является исключительной модельной системой для изучения этой синергии, но результаты в целом, вероятно, применимы к другим киназам. Авторы должны, по крайней мере, поставить вопрос о том, действительно ли фосфорилирование петли активации «управляет» сборкой активной киназы или «облегчает» сборку активной киназы.

    Мы полагаем, что наши данные, особенно результаты ЭПР, показывают, что фосфорилирование действительно управляет сборкой активного состояния, хотя и не стабилизирует активное состояние по сравнению с состоянием DFG-Out, что само по себе примечательно. Мы предпочитаем думать об этом следующим образом: данные доказывают, что фосфорилирование действует путем изменения детальной формы конформационного энергетического ландшафта для состояния DFG-In, а не путем изменения глубины свободной энергетической ямы (по сравнению с таковой для состояния DFG-In). состояние DFG-Out).Мы изменили формулировку в Обсуждении, чтобы прояснить этот момент.

    5) Авторы должны четко заявить, что движущей силой эволюции протеинкиназ, вероятно, является регуляция, а не катализ с максимальной эффективностью.

    Мы внесли поправки в Обсуждение, чтобы уточнить этот момент.

    6) Что касается коррелированных движений С-спирали и гидрофобного позвоночника, мы считаем важным включить этот мотив в ваш анализ, поскольку все они кажутся связанными движениями, включая описанные вами молекулы воды.Несмотря на то, что C-спираль существенно не перемещается в киназах AGC, как вы указываете, решающее значение имеет выравнивание остатков шипа, и в случае киназ AGC большое внимание уделялось «замыканию» R-шипа с гидрофобным мотивом — процесс, который строго регулируется уникальными способами для каждой киназы AGC. С Aurora A у вас есть очень уникальная система, которая позволяет вам разделить аллостерические особенности гидрофобного мотива, поскольку он происходит от другого белка.Тем не менее, концепции, вероятно, будут схожими. По крайней мере, было бы полезно увидеть один рисунок, на котором сравниваются мотив DFG и молекулы воды, а также второй ион Mg с R-шипом в положениях DFG-In и DFG-out — даже если он находится в положении DFG-In и DFG-out. добавка.

    Мы добавили в приложение новый рисунок (рисунок 1 — дополнение к рисунку 2), показывающий сравнение мотива R-позвоночника и DFG в состояниях DFG-In и DFG-Out. Одной из интересных особенностей состояния DFG-Out является то, что роль фенилаланина DFG в R-шипе заменяется остатком триптофана DFGx (W277), который частично восстанавливает гидрофобные контакты R-шипа.Однако полярные взаимодействия Q185 с молекулами воды, характерные для активного состояния, теряются. Мы также внесли поправки в раздел «Обсуждение», чтобы прямо упомянуть наш более ранний результат (Cyphers et al.), что Tpx2 стабилизирует С-спираль и регуляторный шип.

    7) Есть вопрос, связанный с позицией C185, где вы размещаете одну из меток. Этот остаток явно упакован против фенилаланина DFG в положении DFG-out. Cys сама по себе довольно гидрофобна, как и ваш зонд.Вы демонстрируете, что свойства модифицированного белка напоминают свойства белка дикого типа. Однако знаете ли вы, что произойдет, если вы замените этот Cys на Ala? Это активирующая мутация? Казалось бы, уникальное положение этого Cys может способствовать поддержанию DFG в неингибированном состоянии. Возможно ли это?

    В нашей более ранней работе (см. Cyphers et al., 2017) мы заменили остаток Q185 несколькими разными аминокислотами, обнаруженными в этом положении в разных ePK.Всего мы протестировали Q185C, Q185N, Q185L, Q185M и Q185H. Мы обнаружили, что все мутации вредны для активности фосфорилированного фермента, но активность большинства мутантов можно в значительной степени или полностью восстановить, активируя как фосфорилирование, так и Tpx2. Интересно, что Q185N была самой опасной мутацией, и ее можно было спасти лишь частично. Мы не тестировали мутацию Q185A, поскольку аланин обычно не встречается в этом положении в ePK. Вполне возможно, что некоторые из эффектов замен на активность киназы обусловлены дифференциальной стабилизацией состояний DFG-Out и DFG-In, но, как описано в нашей статье Nat Chem Biol, мы приписали большую часть эффектов разрушению сеть водородных связей, опосредованная водой, зародилась Q185.Учитывая в целом хорошее соответствие между данными ИК, полученными с неестественным зондом Q185CN, и данными FRET и ЭПР, полученными с нативным остатком Q185 в активном центре, кажется вероятным, что любое нарушение равновесия DFG зондом относительно незначительный, хотя мы не можем исключить некоторый эффект. Мы добавили предложение в раздел IR, указывающее на это предостережение.

    https://doi.org/10.7554/eLife.32766.019

    Лучший выбор лодок и яхт в стране!

    Информация об автомобиле Северная PointSkipper Почки — OshkoshSkipper Почки — PewaukeeSkipper Почки — Sequoit HarborSkipper Почки — VoloSkipperBud в — Бей CitySkipperBud в — Belle MaerSkipperBud в — Касс Лейк MarinaSkipperBud в — Гранд HavenSkipperBud в — Озеро FentonSkipperBud в — Озеро GenevaSkipperBud в — Mac Ray HarborSkipperBud в — MadisonSkipperBud в — Marina Del IsleSkipperBud — Северная PointSkipperBud в — OshkoshSkipperBud-х — PewaukeeSkipperBud’s — Sequoit HarbourSkipperBud’s — Sturgeon BaySkipperBuds — Bay CitySkipperBuds — Belle MaerSkipperBuds — Cass Lake MarinaSkipperBuds — Grand HavenSkipperBuds — Lake FentonSkipperBuds — Женевское озероSkipperBuds — Mac Ray Ha rborSkipperBuds — MadisonSkipperBuds — Марина-дель-АйлSkipperBuds — МилуокиSkipperBuds — Норт-ПойнтSkipperBuds — ОшкошSkipperBuds — ПеваукиSkipperBuds — Сан-ДиегоSkipperBuds — Sequoit HarbourSkipperBuds — Стерджен-БейSkipperBuds — VoloSkipperBuds Ft.

    Дополнительные комментарии уведомление.

    1. Мы собираем непубличную личную информацию о вас из следующих источников: Информация, которую мы получаем от вас в приложениях или других формах; Информация о ваших транзакциях с нами, нашими аффилированными лицами или другими лицами; и Информация, которую мы получаем от агентства по информированию потребителей (например,г., бюро кредитных историй).

    2. Мы можем раскрывать всю информацию, которую мы собираем, как описано выше, компаниям, которые предоставляют маркетинговые услуги от нашего имени, или финансовым учреждениям, с которыми у нас есть совместные маркетинговые соглашения. Мы можем раскрывать информацию о вас как о потребителе, клиенте или бывшем клиенте.

    3. Мы также можем раскрывать непубличную личную информацию о вас как о клиенте, клиенте или бывшем клиенте неаффилированным третьим лицам, как это разрешено законом.

    4.Мы ограничиваем доступ к непубличной личной информации о вас тем сотрудникам дилерских центров, которым необходимо знать эту информацию, чтобы определить ваше право на получение продуктов и услуг и предоставлять вам продукты и услуги, а также тем, на кого распространяются положения и ограничения конфиденциальности. которые запрещают использование информации помимо выполнения определенных услуг. Для защиты вашей непубличной личной информации мы поддерживаем физические, электронные и процедурные меры безопасности, соответствующие федеральным стандартам.

    Отправляя это заявление, вы подтверждаете, что вся информация в форме является точной и полной, насколько вам известно. Вы также подтверждаете, что вы компетентны заключать контракты и что в настоящее время не ведется или не ожидается разбирательства по делу о банкротстве, в котором вы участвуете. Обратите внимание, что кредит предоставляется на основе баллов, истории платежей, активов и т. д., и решение принимается банком, а не нами. Мы можем оставить это заявление независимо от того, предоставлен кредит или нет. Вы соглашаетесь оплачивать все сборы, связанные с вашим кредитом.Вы разрешаете нам получать от других информацию о вашей кредитоспособности и другую соответствующую информацию, влияющую на это приложение. Ваша электронная подпись подтверждает, что вы понимаете нашу политику, положения и условия, и даете нам разрешение на выдачу кредита.

    Я/МЫ ПРОЧИТАЛИ И ПОНЯЛИ ПОЛИТИКУ, ПОЛОЖЕНИЯ И УСЛОВИЯ ДИЛЕРА. Я / МЫ НАСТОЯЩИМ ПОДТВЕРЖДАЮ, ЧТО ВСЯ ИНФОРМАЦИЯ В ЭТОМ ЗАЯВЛЕНИИ И ВСЕ ЗАЯВЛЕНИЯ, СДЕЛАННЫЕ В НЕЙ, ЯВЛЯЮТСЯ ПРАВИЛЬНЫМИ И ПРАВИЛЬНЫМИ, И ЧТО Я/МЫ ЯВЛЯЕМСЯ/ЯВЛЯЕМСЯ ЛИЦОМ (ЛИЦАМИ) В ЗАЯВЛЕНИИ, А НЕ ИСКУССТВЕННЫМ ПРЕДСТАВЛЕНИЕМ.ИНФОРМАЦИЯ ПРЕДОСТАВЛЯЕТСЯ ДЛЯ ЦЕЛЕЙ ПОЛУЧЕНИЯ КРЕДИТА И УПОЛНОМОЧИВАЕТ ДИЛЕРА СДЕЛАТЬ ТАКИЕ ЗАПРОСЫ, КОТОРЫЕ НЕОБХОДИМЫ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КРЕДИТНОЙ ИНФОРМАЦИИ И РАЗРЕШАЮТ МОИМ БАНКАМ, ПОСТАВЩИКАМ И КРЕДИТНЫМ ССЫЛКАМ НА ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ ИНФОРМАЦИИ, КАСАЮЩЕЙСЯ МОИХ СЧЕТОВ.

    Веб-сайт

    Список несостоятельных банков: 2009-2022

    Community National Bank, Lino Lakes, Minn. 17.12.2010 3,7
    Первый Южный Банк, Бейтсвилл, Арканзас, 17.12.2010 22.8
    United Americas Bank, Атланта 17.12.2010 75,8
    Appalachian Community Bank, McCaysville, Ga. 17.12.2010 26
    Chestatee State Bank, Доусонвилл, Джорджия, 17.12.2010 75,3
    Банк Майами, Корал Гейблс, Флорида 17.12.2010 64
    Банк Earthstar, Саутгемптон, Пенсильвания, 10.12.2010 22.9
    Paramount Bank, Фармингтон-Хиллз, Мичиган, 10.12.2010 90,2
    Первый банковский центр, Берлингтон, Висконсин 19.11.2010 142,6
    Allegiance Bank of North America, Bala Cynwyd, PA 19.11.2010 14,2
    Gulf State Community Bank, Carrabelle, FL 19.11.2010 42,7
    Банк Коппер Стар, Скоттсдейл, Аризона. 12.11.2010 46,3
    Darby Bank & Trust Co., Видалия, Джорджия 12.11.2010 136,2
    Tifton Banking Company, Тифтон, Джорджия, 12.11.2010 24,6
    Первый вьетнамско-американский банк, Вестминстер, Калифорния 05.11.2010 9,6
    Пирс Коммершл Бэнк, Такома, Вашингтон 05.11.2010 21,3
    Western Commercial Bank, Вудленд-Хиллз, Калифорния. 05.11.2010 25,2
    K Bank, Randallstown, Md. 05.11.2010 198,4
    First Arizona Savings, Скоттсдейл, Аризона 22.10.2010 32,8
    Hillcrest Bank, Overland Park, Kan. 22.10.2010 329,7
    Первый пригородный национальный банк, Мэйвуд, Иллинойс 22.10.2010 31,4
    Первый национальный банк Барнсвилля, Барнсвилл, Джорджия. 22.10.2010 33,9
    Гордон Банк, Гордон, Джорджия 22.10.2010 9,0
    Прогресс Банк Флориды, Тампа 22.10.2010 25,0
    First Bank of Jacksonville, Джексонвилл, Флорида 22.10.2010 16,2
    Premier Bank, Джефферсон-Сити, Миссури, 15.10.2010 406,9
    WestBridge Bank & Trust Co., Честерфилд, Миссури, 15.10.2010 18,7
    Сберегательный банк безопасности, Олате, Канзас 15.10.2010 82,2
    Шорлайн Бэнк, Шорлайн, Вашингтон, 01.10.2010 41,4
    Банк Вакулла, Кроуфордвилль, Флорида, 01.10.2010 113,4
    Haven Trust Bank Florida, Ponte Verde Beach, FL 24.09.2010 31.9
    Банк Норт-Каунти, Арлингтон, Вашингтон, 24.09.2010 72,8
    Морской сберегательный банк, Уэст-Эллис, Висконсин 17.09.2010 83,6
    Сберегательный банк Брамбл, Милфорд, Огайо 17.09.2010 14,6
    Народный банк, Уиндер, Джорджия, 17.09.2010 98,9
    First Commerce Community Bank, Дугласвилль, Джорджия. 17.09.2010 71,4
    Банк Эллиджей, Эллиджей, Джорджия 17.09.2010 55,2
    ISN Bank, Cherry Hill, NJ 17.09.2010 23,9
    Горизонт Бэнк, Брадентон, Флорида 10.09.2010 58,9
    Банк долины Сонома, Сонома, Калифорния 20.08.2010 10,1
    Лос Падрес Банк, Солванг, Калифорния. 20.08.2010 8,7
    Сообщество Бьютт Банк, Чико, Калифорния 20.08.2010 17,4
    Пасифик Стейт Банк, Стоктон, Калифорния 20.08.2010 32,6
    Шорбанк, Чикаго 20.08.2010 367,7
    Imperial Savings and Loan Association, Martinsville, VA 20.08.2010 3,5
    Независимый национальный банк, Окала, Флорида. 20.08.2010 23,2
    Национальный банк Сообщества в Бартоу, Бартоу, Флорида 20.08.2010 10,3
    Палос Банк и трастовая компания, Палос Хайтс, Иллинойс 13.08.2010 72
    Равенсвуд Банк, Чикаго 06.08.2010 68,1
    LibertyBank, Юджин, Орегон 30.07.2010 115,3
    The Cowlitz Bank, Лонгвью, Вашингтон. 30.07.2010 68,9
    Прибрежный общественный банк, Панама-Сити-Бич, Флорида, 30.07.2010 94,5
    Сберегательный банк Бейсайд, Порт-Сент-Джо, Флорида, 30.07.2010 16,2
    Northwest Bank and Trust, Acworth, Ga. 30.07.2010 39,8
    Home Valley Bank, Cave Junction, Ore. 23.07.2010 37,1
    Юго-западный банк США, Лас-Вегас 23.07.2010 74.1
    Банк общественной безопасности, Новая Прага, Миннесота 23.07.2010 18,6
    Тандер-Бэнк, Сильван-Гроув, Канзас 23.07.2010 4,5
    Первый национальный банк Вильямсбурга, Кингстри, Южная Каролина 23.07.2010 8,8
    Crescent Bank and Trust Company, Джаспер, Джорджия, 23.07.2010 242,4
    Стерлинг Банк, Лантана, Флорида. 23.07.2010 45,5
    Сберегательный банк Mainstreet, Гастингс, Мичиган 16.07.2010 11,4
    Общественный банк Olde Cypress, Клевистон, Флорида, 16.07.2010 31,5
    Банк Тернберри, Авентура, Флорида 16.07.2010 34,4
    Метро Банк округа Дейд, Майами 16.07.2010 67,6
    Первый Национальный Банк Юга, Спартанбург, С.С. 16.07.2010 74,9
    Банк Вудлендс, Блаффтон, Южная Каролина 16.07.2010 115
    Национальный банк Хоум, Блэкуэлл, Оклахома 09.07.2010 78,7
    Банк США, Порт-Честер, Нью-Йорк 09.07.2010 61,7
    Идеальный федеральный сберегательный банк, Балтимор, штат Мэриленд, 09.07.2010 2,1
    Bay National Bank, Балтимор, Мэриленд. 09.07.2010 17,4
    High Desert State Bank, Альбукерке, Нью-Мексико, 25.06.2010 20,9
    Первый национальный банк, Саванна, Джорджия 25.06.2010 68,9
    Пенинсула Бэнк, Энглвуд, Флорида 25.06.2010 194,8
    Банк безопасности Невады, Рено 18.06.2010 80,9
    Вашингтонский первый международный банк, Сиэтл 11.06.2010 158.4
    Банк TierOne, Линкольн, Небраска, 04.06.2010 297,8
    Сберегательный банк Arcola Homestead, Аркола, Иллинойс, 04.06.2010 3,2
    Первый национальный банк, Роуздейл, Миссисипи 04.06.2010 12,6
    Банк Гранит Сообщество Гранит Бэй, Калифорния 28.05.2010 17,3
    Банк Флориды – Тампа 28.05.2010 40.3
    Банк Флориды – Юго-Запад, Неаполь 28.05.2010 91,3
    Банк Флориды – юго-восток, Форт-Лодердейл 28.05.2010 71,4
    Сан-Уэст-Бэнк, Лас-Вегас 28.05.2010 96,7
    Pinehurst Bank, Сент-Пол, Миннесота 21.05.2010 6
    Midwest Bank & Trust Co., Элмвуд Парк, Иллинойс 14.05.2010 216.4
    Юго-западный общественный банк, Спрингфилд, Миссури, 14.05.2010 29
    Нью Либерти Банк, Плимут, Мичиган 14.05.2010 25
    Общественный банк Satilla, Сент-Мэрис, Джорджия, 14.05.2010 31,3
    1-й Тихоокеанский банк Калифорнии, Сан-Диего 07.05.2010 87,7
    Таун Бэнк оф Аризона, Меса 07.05.2010 41.8
    Access Bank, Чамплин, Миннесота 07.05.2010 5,5
    Банк Бонифей, Бонифей, Флорида 07.05.2010 78,7
    Frontier Bank, Эверетт, Вашингтон 30.04.2010 1 370
    Британская Колумбия Национальные банки, Батлер, Миссури 30.04.2010 11,4
    Champion Bank, Creve Coeur, Mo. 30.04.2010 52.7
    CF Bancorp, Порт-Гурон, Мичиган, 30.04.2010 615,3
    Вестернбанк Пуэрто-Рико, Маягуэс 30.04.2010 3 310
    R-G Premier Bank of Puerto Rico, Hato Rey 30.04.2010 1 230
    Евробанк, Сан-Хуан, Пуэрто-Рико 30.04.2010 743,9
    Уитленд Банк, Нейпервилл, Иллинойс 23.04.2010 133
    Peotone Bank & Trust Co., Пеотоне, Иллинойс, 23.04.2010 31,7
    Сберегательный банк Линкольн Парк, Чикаго 23.04.2010 48,4
    Банк Нью Сенчури, Чикаго 23.04.2010 125,3
    Citizens Bank & Trust Co., Чикаго 23.04.2010 20,9
    Бродвей Бэнк, Чикаго 23.04.2010 394,3
    Amcore Bank, Рокфорд, Иллинойс. 23.04.2010 220,3
    Сити Банк, Линнвуд, Вашингтон, 16.04.2010 323,4
    Тамальпаис, Сан-Рафаэль, Калифорния 16.04.2010 81,1
    Инновационный банк, Окленд, Калифорния 16.04.2010 37,8
    Банк Батлер, Лоуэлл, Массачусетс 16.04.2010 22,9
    Риверсайд Национальный банк Флориды, Форт-Пирс 16.04.2010 491.8
    American First Bank, Клермон, Флорида 16.04.2010 10,5
    Первый федеральный банк Северной Флориды, Палатка 16.04.2010 6
    Общественный банк Лейксайд, Стерлинг-Хайтс, Мичиган, 16.04.2010 11,2
    Beach First National Bank, Миртл-Бич, Южная Каролина 09.04.2010 130,3
    Банк Дезерт-Хиллз, Финикс 26.03.2010 106.7
    Национальный банк Единства, Картерсвилл, Джорджия, 26.03.2010 67,2
    Ки-Уэст-Бэнк, Ки-Уэст, Флорида 26.03.2010 23,1
    Коммерческий банк McIntosh, Кэрроллтон, Джорджия, 26.03.2010 123,3
    Государственный банк Авроры, Аврора, Миннесота 19.03.2010 4,2
    First Lowndes Bank, Форт Депозит, Алабама, 19.03.2010 38.3
    Банк Хайавасси, Хайавасси, Джорджия 19.03.2010 137,7
    Appalachian Community Bank, Ellijay, Ga. 19.03.2010 419,3
    Advanta Bank Corp, Дрейпер, Юта 19.03.2010 635,6
    Банк безопасности Сенчури, Дулут, Миннесота 19.03.2010 29,9
    Американский национальный банк, Парма, Огайо 19.03.2010 17.1
    Statewide Bank, Covington, La. 12.03.2010 38,1
    Олд Южный Банк, Орландо, Флорида 12.03.2010 94,6
    Банк Парк Авеню, Нью-Йорк 12.03.2010 50,7
    ЛибертиПойнт Банк, Нью-Йорк 11.03.2010 24,8
    Банк Сентенниал, Огден, Юта 05.03.2010 96.3
    Уотерфилд Банк, Джермантаун, Мэриленд 05.03.2010 51
    Банк Иллинойса, Нормал 05.03.2010 53,7
    Sun American Bank, Бока-Ратон, Флорида, 05.03.2010 103,8
    Ренье Пасифик Банк, Такома, Вашингтон 26.02.2010 95,2
    Банк сообщества Карсон-Ривер, Карсон-Сити, штат Невада, 26.02.2010 7.9
    La Jolla Bank, La Jolla, Калифорния 19.02.2010 882,3
    Сберегательный банк Джорджа Вашингтона, Орланд Парк, Иллинойс 19.02.2010 141,4
    Национальный банк Ла-Кост, Ла-Кост, Техас 19.02.2010 3,7
    Общественный банк Марко, остров Марко, штат Флорида, 19.02.2010 38,1
    Первый американский государственный банк Миннесоты, Хэнкок 05.02.2010 3.1
    American Marine Bank, Бейнбридж-Айленд, Вашингтон, 29.01.2010 58,9
    Первый региональный банк, Лос-Анджелес 29.01.2010 825,5
    Community Bank & Trust, Корнелия, Джорджия, 29.01.2010 354,5
    Банк Маршалл, Халлок, Миннесота 29.01.2010 4.1
    Общественный банк Флориды, Иммокали 29.01.2010 352.6
    Первый национальный банк Джорджии, Кэрроллтон 29.01.2010 260,4
    Берег реки Колумбия, Даллес, штат Орегон 22.01.2010 172,5
    Эвергрин Банк, Сиэтл, Вашингтон 22.01.2010 64,2
    Чартерный банк, Санта-Фе, Нью-Мексико, 22.01.2010 201,9
    Банк Литона, Литон, Миссури 22.01.2010 8.1
    Premier American Bank, Майами, Флорида, 22.01.2010 85
    Городской общественный банк и траст, Антиохия, Иллинойс 15.01.2010 17,8
    St. Stephen State Bank, St. Stephen, Minn. 15.01.2010 7,2
    Barnes Banking Company, Кейсвилл, Юта 15.01.2010 271,3
    Horizon Bank, Беллингем, Вашингтон. 08.01.2010 539,1

    Категория:Фильмы — База данных огнестрельного оружия в Интернете

    Из базы данных огнестрельного оружия в Интернете — оружие в кино, телевидении и видеоиграх

    A • B • C • D • E • F • G • H • I • J • K • L • M • N • O • P • Q • R • S • T • U • V • W • X • Y • Я

    Этот список состоит из всех фильмов, для которых были созданы страницы на IMFDB.Если вы создаете новую страницу для фильма, не забудьте добавить [[Категория:Фильм]] на страницу, чтобы он отображался здесь.

    Страниц в категории «Фильмы»

    Следующие 200 страниц относятся к этой категории из 6813 страниц.

    (предыдущие 200) (следующие 200)

    T

    У

    • У-571
    • У-900
    • Разворот
    • Маршалы США
    • УВЧ
    • Абсолютное оружие,
    • Ультрафиолет
    • Ульзана
    • Umbrella Coup (Le Coup du parapluie)
    • Неверующий,
    • Нерушимый
    • Непрерывный
    • Необычная доблесть
    • Незавоеванный, (Непоразени)
    • Непокрытый
    • Нежить
    • Под каменным небом
    • Под Авророй
    • Под огнем
    • Под флагом (Бахо Бандера)
    • В условиях военного положения (По законам военного времени)
    • В осаде
    • В осаде 2: Темная территория
    • Под подозрением
    • Первоклассник
    • Блюз под прикрытием
    • Брат под прикрытием
    • Другой мир (2003)
    • Подземный мир Ю.ЮАР
    • Другой мир: Пробуждение
    • Другой мир: Кровавые войны
    • Другой мир: Эволюция
    • Бесспорный (2002)
    • Undisputed II: Последний выживший
    • Неоспоримый III: Искупление
    • Отмена
    • Незаконченный ужин (Незаконченный ужин)
    • Незабываемый Год 1919 (Незабываемый 1919 год),
    • Непрощенный (1992)
    • Непрощенный (2013)
    • Незабытые тени
    • Удаленный из друзей
    • Подразделение 7 (Группа 7)
    • Универсальный солдат
    • Универсальный солдат: День расплаты
    • Универсальный солдат: Регенерация
    • Универсальный солдат: Возвращение
    • Неизвестно (2006)
    • Неизвестно (2011)
    • Неизвестные страницы из жизни разведчика
    • Неизвестный солдат, The (1955)
    • Неизвестный солдат, The (1985)
    • Неизвестный солдат, The (2017)
    • Незаконное проникновение
    • Развязанный
    • Без шрамов,
    • Неудержимый (2010)
    • Неукротимая Анжелика
    • Немыслимое
    • До самой смерти
    • До конца (Až do konce)
    • Неприкасаемые, The (1987)
    • Неотслеживаемый
    • Непокоренный (L’Insoumis),
    • Наверху на вилле
    • В воздухе

    U прод.

    В

    • V для Вендетты
    • В.И. Варшавский
    • В/Х/С/2
    • Вабанк
    • Вабанк II
    • Вакансия
    • Бумаги Валачи,
    • Валерий Чкалов
    • Валькирия
    • Долина Смерти,
    • Долина Волков: Ирак
    • Вампир в Бруклине
    • Секс-дневники вампира,
    • Вампиры
    • Вампиры: Лос Муэртос
    • Ван Хельсинг
    • Ван Уайлдер: год первокурсника
    • Точка схода
    • Точка обзора
    • Варес: ​​частный сыщик
    • Автомобиль 19
    • Бархатный сезон (Бархатный сезон)
    • Вендетта
    • Месть
    • Месть Крылатого Змея (La vengeance du serpent à plumes),
    • Веном (2005)
    • Вера Крус
    • Верден: видения истории
    • Паразиты, The (Škodná)
    • Против (2000)
    • Гонки по вертикали
    • Головокружение
    • Тот же Мюнхгаузен (Тот самый Мюнхгаузен),
    • Ветеран, The (2006)
    • Ветеран, The (2011)
    • Вице (2008)
    • Вице (2015)
    • Порок (2018)
    • Замкнутый круг (кольцо Сулетуд)
    • Виктор (Победитель),
    • Победоносное возвращение (Маджуп ар узвару)
    • Победа
    • Видеодром
    • Отряд линчевателей
    • Деревня проклятых (1995)
    • Злодей,
    • Убежище Вилмарк
    • Насилие Джек
    • Жестокий город
    • Violent City (Roma Violenta)
    • Жестокий полицейский
    • Жестокая четверка, Бандиты в Милане
    • Виолент Неаполь (Napoli Violenta)
    • Жестокие профессионалы,
    • Насильственная провинция (Provincia Violenta)
    • Гадюка (1988)
    • Гадюка (Гадюка),
    • Вирусный фактор,
    • Целина Поднятая (Поднятая целина)

    В прод.

    Вт

    • Плата за страх,
    • Глубокий по пояс
    • Дождитесь Джона Графтона (Гайдит «Дзону Графтону»)
    • Жди меня (жди меня)
    • Остров Уэйк
    • Пробуждение смерти
    • Проснись и умри (Svegliati e uccidi)
    • Прогулка
    • Ходячие мертвецы (1995)
    • Высокий шаг (1973)
    • Высокий шаг (2004)
    • Шагать высоко: одинокое правосудие
    • Шагать высоко: расплата
    • Слишком быстрая ходьба (Пута)
    • Уолл-Стрит
    • Стена, The (2017)
    • Вальтер защищает Сараево (Вальтер Брани Сараево)
    • Вальс с Баширом
    • Странствующий Стрелец (Стрелец неприкаянный)
    • Хочу остаться в живых (Le denier du colt)
    • Разыскивается
    • Разыскивается: живым или мертвым (1987)
    • Война (2007)
    • Война (Война)
    • Война дома,
    • Боевые псы
    • Война за планету обезьян
    • Боевой конь
    • Боевая машина
    • Война мертвых
    • Война миров (2005)
    • Война миров, The (1953)
    • Боевые свиньи
    • Боевой фургон,
    • Война, Inc.
    • Война,
    • Боевые птицы
    • Пользователь:Warejaws/Песочница
    • Военные игры
    • Чернокнижник (1959)
    • Военачальники Атлантиды
    • Военачальники,
    • Теплые тела
    • Сердце воина,
    • Путь воина,
    • Уорриорз (Геррерос)
    • Воины,
    • Темная Варшава
    • Васаби
    (предыдущие 200) (следующие 200)

    Не продавать мою личную информацию

    ESPN Баскетбол Рекрутинг — Рейтинг игроков

    C

    3 SG 9

    3 SF SG93 PG
    ‘917’42 917’42 489 PG 170
    C SG
    PG PG PG99

    SG

    SG SG SF SG SF PG9 SG
    PG9

    SG

    C PF
    SG
    PG9

    93 PG

    9

    9
    C
    C
    C
    RK PLAYER POS HOMETOWN HT WT STARS GRADE ШКОЛА
    1 PF Chicago, IL
    перспективы Чартерная Школа
    6’10 » 200 98


    Kentucky Подпись

    2 Миддлтон, CT
    St.Томас больше школы
    6’10 » 275 275 98 9000 9 9289


    3 3 9114
    зимний парк, FL
    зимний парк Высшая школа
    6’4 » 189
    98 9000

    герцога
    подписан

    4 4 9114
    Somerdale, NJ
    Saint Patrick’s High
    6’7 » 210 98


    Kentucky Подпись

    5 Сент-Луис, Миссури
    Chaminade колледж
    6’4 » 205 98

    Флорида
    Подпись

    6 PF Кристиан, Вирджиния 97 Норфолк, Вирджиния Hool 6’8 » 216 98

    N Каролина
    Подпись

    7 PF North Chicago, IL
    Westchester Country Day School
    6 90 » 210 98

    Baylor
    подписан

    8
    9114
    Индианаполис, в
    щуки Высшая школа
    6’2′ 175 98


    Kentucky Подпись

    9 SF Memphis, TN
    Мелроуз средней школы
    6’6 » 210 97

    Мемфис
    Подпись

    10 SF Даллас, Техас
    Средняя школа Линкольна
    230 97


    Оклахома-Сент Подпись

    11 Торонто, Онтарио, CAN-
    Финдли Колледж Prep
    6’2 » 97


    Техас Подпись

    12 Монреаль, Квебек, CAN
    Нотр-Дам Prep
    6’9 » 210 97

    Питтсбург
    Подпись

    13 Гринсборо, Северная Каролина
    Харгрейв Военная академия
    6’5 » 220 97


    N Каролина Подпись

    14 PF Вашингтон, Индиана
    Средняя школа Вашингтона
    6’11» 210 97


    Indiana Подпись

    15 Sacramento, CA
    Качество образования Академия
    6’3 » 185 97


    Аризона Подпись

    16 Florissant, MO
    McCluer North High School
    6’3 » 170 97


    Arkansas Подпись

    17 Рентон, WA
    Garfield High School
    6’4 » 206 97


    Вашингтон Подпись

    18 SF Портсмут, Вирджиния
    I.C
    6’9 » 9’9 » 221 979 97 972 9289

    Kentucky
    Подписано

    20
    C
    Philadelphia, PA
    Академия новой церкви
    6’9 ‘ 292
    222 972837 979

    Syracuse
    Подписано

    21
    SG Hamilton, MA
    St.Эндрю Школа
    6’5 » 175 97


    Сиракузы Подпись

    22 SG Гилберт, AZ
    Финдли College Prep
    6’3 » 185 97


    Arizona Подпись

    23 SF Gary, IN
    Лью Уоллес High School
    6’6 » 220 96


    Мичиган Сент Подпись

    24 Greenville, Джорджия
    Гринвилл Высшая школа
    6’4 » 190 96

    Джорджия
    Подписано

    25 Сан-Франциско Розвилл, Мичиган
    Академия качественного образования
    6’6» 195 96

    ул.Джон
    Подпись

    26 Oakland, CA
    Oakland High School
    6’3 » 200 96


    Орегон Подпись

    27 Chicago, IL
    Morgan Park High School
    6’5 » 205 96


    Луисвилл Подпись

    28 PF Боулинг Грин, KY
    Bowling Green High School
    6’7 » 230 96


    Луисвилл Подпись

    29 Chester, VA
    Benedictine College Prep
    6’6» 194 96

    Duke
    Подпись 9 2796

    30 Madison, AL
    Bob Jones High School
    6’5 » 180 96


    Alabama Подпись

    31 SF Meridian, MS
    Средняя школа Meridian
    6’7» 190

    290 906 Мисс.Санкт-


    Подпись

    32 Акрон, Огайо
    Брюстера Academy
    6’8 » 200 96
    33 SG Alpharetta, GA
    Milton High School
    6’2 » 185 96


    Vanderbilt Подпись

    34 Alpharetta, GA
    Милтон Высшая школа
    6’2 » ‘170489 170 96


    35 C Варшава, в
    Школа Христа
    6 ’11» 215 96

    Герцог
    Подпись

    36

    2

    2 SG
    Лепанто, AR
    East Пойнсетт High School
    6’5 » 195 96


    Arkansas Подпись

    37 Балтимор, MD
    Baltimore City College High School
    6’6 » 175 96


    Мэриленд Подпись

    38 Хьяттсвилль, MD
    Oak Hill Academy
    6’1 » 180489 18042 96 96

    герцога
    подписан

    39 911 39
    SF Queens, NY
    Shouth Kent School
    6’6 » 200 96

    ул.Джон
    Подпись

    40 Хантсвилле, AL
    SR Butler High School
    6’3 » 200 96


    Alabama Подпись

    41 SF South Kingstown, RI
    Школа Святого Марка
    6’8 » 215 96


    Duke Подпись

    42 SF Sikeston, MO
    Scott County Central High School
    6’9 » 200 96


    Georgetown Подпись

    43 C Бирмингем, Мичиган
    Detroit Country Day School
    6’10» 220 95

    Огайо Государственный
    Подпись

    44 Indianapolis, IN
    Лаврентия North High School
    6’10 » 225 95
    45 SF Chicago, IL
    Уитни Янг High School
    6’7 » 185 95


    штата Огайо Подпись

    46 Кливленд, MS
    East Side High School
    6’10 » 245 95


    LSU Подпись

    47 Беллэйр, TX
    Беллэйр High Школа
    6 футов 5 дюймов 190 95

    Техас
    Подпись

    9 9148 SF Raleigh, NC
    Hargrave Военная академия
    6’5 » 220 95


    Xavier Подпись

    49 SF Сент-Луис, Миссури
    Christian Life центр академия
    6’5 » 185 95


    Канзас Подпись

    50 Phoenix, AZ
    Меса Высшая школа
    5’11 » » 160489 95
    95 9289

    51 51
    Humble, TX
    Грейс подготовительная академия
    6 ‘ 3» 163 95

    Texas A&M
    Подпись

    52 9144 3 SG San Diego, CA
    Abraham Lincoln High School
    6’2 » 175 95


    UCLA Подпись

    53 SF Джексон, MS
    Academy academy
    6’8 » 200 95 95489

    9289


    54 54 SF Greensboro, NC
    Westchester День школы
    6’4 » 180 95 9289

    9289

    9279

    55
    9114 PF Jonesboro, AR
    Westse High
    6’10 » 220 95 95

    Arkansas
    Подписано

    56 C Philadelphia, PA
    Имхотеп институт Устав средней школы
    6’8 » 220 95


    Джорджа Мейсона Подпись

    57 Луисвилл, Кентукки
    Jeffersontown High School
    6’10 » 230 95


    Луисвилл Подпись

    58 Philadelphia, PA
    академии Новой Церкви
    6’11 » 214 95


    Pittsburgh Подпись

    59 Richmond, VA
    Распорядитель Школа
    6’9 » 225 95

    Чарлстон
    Подпись

    60
    32 PG Рок-Айленд, Иллинойс
    Rock Island High School 6’1 » 170 94


    Stanford Подпись


    61 PF San Diego , Ca
    herbert hoover средней школы 6’8 » 210 94 94 92 9289

    9279

    9279

    62 PF PF San Antonio, TX
    Antonian College College 6’8 » 220 94 94

    Texas
    Подписано

    63 911 9289 PG
  • 3 PG Paterson, NJ
    St.Anthony High School 5’9 » 155 94


    Рутгерса Подпись

    64 SG Missouri City, TX
    Даллес High School 6 ‘3’ ‘ 180489 180 94 94

    St. John’s


    659 9114 SG Wilmington, De
    Sanford School 6’4′ ‘ 185 94


    Сиракузы Подпись


    66 PG Plainfield, NJ
    Montrose Christian School 6’3 » 185 94

    Вилланова
    Подпись

    67 PG Мемфис, Теннесси
    Средняя школа Мелроуз 5’10 » ‘ 16537 94 94 68 9114 9114 9279 Kent, Wa
    Kentridge Высшая школа 6’2′ 175 94 94 94 94


    Гонзага Подпись

    69 PF Alpharetta, GA
    Milton High School 6’8 » 200 94


    Georgia Tech Подпись

    70 C Чикаго, Иллинойс
    St.IGNATIUS College College 6’10 » 220 220 94 94 9289

    91 9279

    71 SF Desoto, TX
    SEECOTO SESOTO 6’7 » 200 94

    Florida St
    Подпись

    73 SG Norcross, GA
    Greater Atlanta Christian School 6’5 » 205 94


    Вирджиния Подпись


    74 PG Aurora, IL
    Aurora East High School 6’2 » 165 94

    UConn
    Подпись

    75 SG Southfield, MI
    Средняя школа Southfield 9048 9 6’1 » 6’1 » ‘ 205 94 949


    76 911 7699 SG La Marque, TX
    La Marque High School 6’3 » 1909 94 94

    Texas
    Подписано

    77 77 9799 PF Long Beach, CA
    Цена Высшая школа 6 94 78 C Хьяттсвилль, MD
    DeMatha католической средней школы 6’8 » 210 93


    Georgetown Подпись

    79 SG Мемфис, Теннесси
    Средняя школа Уайт Стейшн 6’2» 190 7 84 8 Миннесота
    Подпись

    80 SG Jenkintown, PA
    Abington Друзья Школа 6’5 » 200 93


    Georgetown Подпись

    81 SG Клермонт, FL
    Hargrave Военная академия 6’4 » 175 93

    Virginia Tech
    Подпись


    82 C Toronto, Ontario, CAN
    Хантингтон Prep 7’4 » 330 93

    Нью-Мексико Санкт-
    Подписано


    83 C Raleigh, NC
    Христианская академия «Слово Божье» 6’10» 240 93 904 50 84 PG Columbus, OH
    Northland High School 6’1 » 170 93


    Мичиган Подпись

    85 PG Lewisburg, TN
    Marshall County High School 6’3 » 200 93


    Vanderbilt Подпись

    86 PG Вустер, MA
    Brewster Academy 6’0 » 170 92


    Канзас Подпись


    87 PG Chicago, IL
    Mount Carmel High School 6’1» 175 92

    Иллинойс
    Подпись

    882 89 PF Charlotte, NC
    Charlotte Christian School 6’7 » 210 92

    S Каролина
    Подпись


    89 SF Merrill, WI
    Меррилл средней школы 6’7 » 185 92


    Вирджиния Подпись


    90 PF Cedar Rapids, IA
    Джефферсон Старший Высшая школа 6’8 » 200 92 92

    Wisconsin
    подписано

    9 91 PF Чикаго, IL
    De La Salle Institute 6 ‘ 8 дюймов 220 92

    Иллинойс
    Подпись

    92477 Килин, TX
    Килин High School 6’8 » 210 92


    Houston Подпись


    93 PF Лонг-Бич, Калифорния
    Long Бич политехнический средней школы 6’8 » 215 92

    Бостонский колледж
    Подпись

    94 PF Bronx, NY
    Wadleigh High School 6’8 » 220 92


    Arizona Подпись

    95 SG Minnetonka, MN
    Hopkins High School 6’4 » 200 92

    Миннесота
    Подпись

    96
    Конерс GA
    Рокдейл High School 6’5 » 180 92


    Луисвилл Подпись


    97 SF Chicago, IL
    Орр Academy High School 6’6 » 220 92 92

    Illinois
    Подписано

    98 SF Околона, MS
    Околона Высшая школа 6’6 » 205 92

    Мисс.Санкт-
    Подписано

    99 SF Bridgton, ME
    Bridgton Academy 6’6 » 190 92

    Сент-Джонсе
    Подпись

    100 PF Danville, VA
    Hargrave Военная академия 6’8 » 210 92

    Virginia Tech
    Подпись

    Viacom и NBC

    Компания Viacom заявила, что до вычета налогов ей придется выплатить от 400 до 450 миллионов долларов прибыли компании за четвертый квартал.

    Филипп П. Доман, исполнительный директор Viacom, заявил в своем заявлении в четверг: «Изменения, которые мы вносим в нашу организацию и процессы, помогут Viacom справиться с экономическим спадом и добиться значительной эффективности, которая поможет нам управлять нашим бизнесом. по мере стабилизации рынка и улучшения условий».

    Г-н Дауман и финансовый директор Томас Э. Дули входят в число более чем 1000 старших менеджеров, зарплата которых не будет повышена в 2009 году.Но они все равно могли получить премию, которая составляла большую часть их компенсации. В 2007 году г-н Дауман получил зарплату в размере 2 миллионов долларов США, которая в этом году была увеличена до 2,5 миллионов долларов США. Его премия в прошлом году составила 7 миллионов долларов, а его целевая премия на 2008 год, согласно документам регулирующих органов, составляет 9,5 миллионов долларов.

    Г-н Дули, который также входит в число тех немногих руководителей, чья зарплата раскрывается, получил 1,6 миллиона долларов в 2007 году, а в 2008 году он увеличился до 2 миллионов долларов. Его премия в прошлом году составила 5 долларов.6 миллионов, а его целевой бонус на 2008 год составляет 7,6 миллиона долларов.

    В исследовательской заметке о Viacom, опубликованной в четверг, Майкл Натансон, аналитик Sanford C. Bernstein, сказал, что «ближайшая рекламная среда чревата риском в этой слабой макроэкономической среде, и компания неоднократно доказывала это за последние шесть месяцев.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.